Nome do Projeto
Construção e avaliação de vacinas de subunidade e DNA recombinante contra leptospirose
Ênfase
PESQUISA
Data inicial - Data final
18/03/2012 - 19/03/2014
Unidade de Origem
Área CNPq
Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
Resumo
Espiroquetas patogênicas do gênero Leptospira são causadoras da leptospirose, uma doença zoonótica emergente responsável por cerca de 500 mil casos anuais de infecção severa em todo o mundo. A infecção é contraída por contato direto ou indireto com urina de animais portadores, também por solo, água ou alimentos contaminados. As vacinas utilizadas para controle da infecção são bacterinas, que consistem em isolados locais da bactéria inativada e, por isso, são sorovares específicas e falham em conferir proteção cruzada. Além disso, essas vacinas geram uma imunidade de curta duração, requerendo reforços anuais, e apresentam uma alta reatogenicidade. Atualmente o foco é no desenvolvimento de vacinas recombinantes contra a leptospirose, utilizando componentes da bactéria, como fatores de virulência e de motilidade bacteriana, LPS e proteínas de membrana externa. Novas estratégias para a obtenção e produção de antígenos, bem como diferentes formas de apresentação desses antígenos ao sistema imune tem sido exploradas, como vacinas de subunidade e de DNA recombinante. Vários antígenos têm sido testados e estes apresentam capacidade imunoprotetora variável, contudo, nenhum trabalho obteve proteção heteróloga total, estatisticamente significativa, esterilizante e sem efeitos adversos. Nesse contexto, esse projeto tem por objetivo a produção de vacinas de subunidade e de DNA recombinante, a partir de sequências genômicas de Leptospira, depositadas no GenBank, que codificam para proteínas de membrana externa, transmembrana ou quaisquer que estejam relacionadas com a patogênese da doença, bem como a avaliação do potencial imunoprotetor das mesmas.

Objetivo Geral

Objetivo Geral
•Construir vacinas de DNA e de subunidade recombinante capazes de conferir proteção de amplo espectro contra leptospirose.

Objetivos Específicos
•Selecionar 4 genes que codificam proteínas de membrana externa ou transmembrana, a partir das sequências genômicas de Leptospira depositadas no GenBank e construir primers para sua amplificação;
•Clonar os genes selecionados nos vetores de expressão pAE, pQE30 e pTARGET;
•Produzir as proteínas recombinantes no sistema de expressão heterólogo Escherichia coli e caracterizá-las através de Western blotting com soro humano convalescente;
•Transfectar células eucarióticas com as vacinas de DNA construídas e caracterizá-las através de imunofluorescência com soro humano convalescente;
•Avaliar a inocuidade e potencial imunoprotetor das vacinas produzidas, frente ao desafio homólogo com cepas patogênicas de Leptospira spp em hamsters;
•Avaliar a resposta imune celular e humoral através de Real-Time PCR e ELISA, respectivamente, induzida pelas vacinas nos hamsters imunizados.

Equipe do Projeto

NomeCH SemanalData inicialData final
10
10
10
20
ANA CAROLINA PEITER1201/08/201331/07/2014
ÉVERTON BURLAMARQUE BETTIN1201/08/201431/07/2015
ÉVERTON BURLAMARQUE BETTIN1201/08/201331/07/2014

Fontes Financiadoras

Sigla / NomeValorAdministrador
CAPESR$ 0,00

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