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Considerando o aumento da resistência aos antimicrobianos convencionais, espera-se que os resultados evidenciem a eficácia dos compostos naturais da jabuticaba como agentes inibidores do crescimento bacteriano.
A utilização de recursos fitoterápicos regionais representa uma estratégia promissora para o controle de infecções em animais de produção, com reflexos positivos na saúde coletiva ao reduzir o uso indiscriminado de antibióticos, minimizar os riscos de resistência microbiana fortalecendo práticas sustentáveis que beneficiam tanto os profissionais da cadeia produtiva quanto os consumidores finais.

Amostras
Bactérias
As amostras bacterianas a serem testadas foram isoladas e identificadas
a partir do leite de tanques refrigeradores de leite em propriedades leiteiras de
municípios localizados na região sul do Estado do Rio Grande do Sul.
Serão avaliadas a capacidade bactericida do decocto e do extrato de:
- 10 cepas de Staphylococcus aureus.
- 10 cepas de Streptococcus agalactiae.
- 10 cepas de enterococcus faecalis.
- 10 cepas de Escherichia coli.
Preparo dos extratos alcoólico das cascas e da flor da jabuticaba
As flores e as cascas dos frutos serão secas em ambiente arejado, protegido da luz solar direta. Após a secagem, será realizada a extração alcoólica por meio da imersão do material vegetal em solução de álcool de cereais a 70%, na proporção de 1 parte de planta para 10 partes de álcool. A mistura será mantida sob temperatura controlada de 37 °C por um período de 15 a 20 dias. Decorrido esse tempo, a amostra será submetida à rotaevaporação para remoção do álcool, obtendo-se um concentrado (BRASIL, 2024). Este será acondicionado em frasco previamente autoclavado e armazenado sob refrigeração.
Preparo do decocto das cascas dos frutos das jabuticabas
As cascas de jabuticaba serão inicialmente submetidas à secagem em ambiente ventilado, protegido da luz solar direta. Após a secagem, se realizará a maceração em partículas pequenas. Para o preparo do decocto, será
utilizado a proporção de 10 g da casca da fruta macerada para 100 mL de água destilada. Essa solução será fervida por 20 minutos. Após esse período, o líquido deverá ser resfriado em temperatura ambiente. O conteúdo resfriado deve ser filtrado com gaze estéril e transferido para frascos estéreis previamente preparados. Por fim, o volume original deverá ser completado com água destilada estéril, assegurando a padronização da solução. (Hospital das forças armadas, 2022).
Preparo das suspensões bacterianas
As cepas a serem testadas, armazenadas sob temperatura inferior a -10ºC serão semeadas em meio de cultura Agar Sangue e incubadas em estufa bacteriológica a 37ºC.
Após 24 horas estas colônias serão adicionadas em tubos estéreis com água destilada estéril, na concentração 0,5 da escala de Mc Farland, corresponde a uma suspensão de turbidez que equivale a aproximadamente 1,5 x 10⁸ células bacterianas por mililitro de suspensão.
Testes da CIM dos extratos da flor e das cascas dos frutos das jabuticabas
Para determinar o efeito antimicrobiano dos extratos, estes serão diluídos sucessivamente em tubos contendo água destilada estéril em diferentes concentrações: 50%, 25%, 12,5%, 6,25%, 3,12%, 1,56%, 0,78% e 0,39%. Para o crescimento bacteriano, será preparado o caldo BHI duplo.
Culturas puras de bactérias, previamente cultivadas em Ágar sangue, serão diluídas em água destilada estéril até atingirem turbidez equivalente a 0,5 na escala de McFarland. Todas as cepas bacterianas serão testadas em duplicata.
Em microplacas de poliestireno, serão adicionados 100 μL de BHI duplo, 100 μL dos extratos vegetais nas diferentes concentrações e 10 μL da suspensão bacteriana. Cada microplaca conterá cinco cepas bacterianas distintas para a determinação da concentração inibitória mínima (CIM).
As microplacas serão incubadas por 24 e 48 horas. Após cada período, as alíquotas das amostras serão repicadas em Ágar sangue para verificação da CIM, observando-se a presença ou ausência de crescimento bacteriano. (Karlowsky et al., Richter, 2015). Testes da CIM do decocto das cascas dos frutos das jabuticabas
Para a determinação da atividade antimicrobiana do decocto da casca de jabuticaba, será utilizado o meio de cultura Mueller Hinton Ágar (MHA) em duplicata. O decocto será incorporado ao meio de cultura em diferentes concentrações, na proporção de 1:1 (50% do decocto e 50% do meio MHA). Após a homogeneização, a mistura será vertida em placas de Petri previamente identificadas com as respectivas concentrações do extrato: 50%, 25%, 12,5%, 6,25%, 3,12%, 1,56%, 0,78% e 0,39%.
Para o preparo das amostras bacterianas, estas serão inicialmente cultivadas em Ágar Sangue. Após o crescimento, as colônias serão diluídas em
água destilada estéril até atingirem turbidez equivalente ao padrão 0,5 da escala de McFarland, garantindo uniformidade na inoculação.
A inoculação nos meios contendo o extrato será realizada por pipetagem, utilizando 10 μL da suspensão bacteriana para cada placa. As placas serão então incubadas em estufa a uma temperatura de 37ºC por um período de 24 horas. Após esse intervalo, será realizada a avaliação do crescimento bacteriano, com nova verificação após 48 horas para confirmação dos resultados.(Karlowsky et al., Richter, 2015).

Espera-se que os extratos de jabuticaba tenham ação inibitória sobre bactérias causadoras de mastite.