Nome do Projeto
Pesquisa de microorganismos de potencial zoonótico em Capivaras (Hydrochaeris hydrochaeris) no banhado do Maçarico, em Rio Grande, Rio Grande do Sul
Ênfase
Pesquisa
Data inicial - Data final
01/05/2026 - 30/04/2028
Unidade de Origem
Coordenador Atual
Área CNPq
Ciências Agrárias
Resumo
O Refúgio de Vida Silvestre Banhado do Maçarico possui objetivos de preservação hídrica, ecossistemas e espécies ameaçadas. Capivaras como herbívoros, mantêm a forragem baixa, fertilizam o solo e a água e servem de alimento para predadores. Por outro lado, uma superpopulação de capivaras pode acarretar impactos em áreas urbanas e rurais ou mesmo em áreas de preservação, sendo essencial entender suas tendências populacionais. Elas também são importantes na transmissão de zoonoses como a febre maculosa brasileira na qual a capivara amplifica a população do vetor que é o carrapato, além de serem potenciais reservatórios de agentes causadores da doença de chagas e leishmanioses. Um eventual desequilíbrio na dinâmica populacional de capivaras na região, causaria efeitos negativos como a exposição dos trabalhadores do campo à riscos de saúde relacionados às zoonoses e a fragilização dos seus meios de vida relacionados à geração de emprego e renda neste agroecossistema. A comunidade que habita o Banhado do Maçarico e seu entorno têm relatado uma provável ocorrência de superpopulação de capivaras, a qual impactaria a conservação de outros elementos da biodiversidade nativa, os modos de produção de pecuária extensiva tradicionais na região e colocariam em risco o equilíbrio social e a saúde de seus habitantes.
Objetivo Geral
Estudar aspectos das doenças transmissíveis de capivaras relacionados à saúde animal e humana no Banhado do Maçarico.
Justificativa
As capivaras apresentam hábitos alimentares generalistas, baixa exigência de habitat, e reprodução constante, tais fatores levam a um aumento populacional (Alho et al., 1986; Pinto et al., 2006). O desequilíbrio populacional destes animais leva à riscos na saúde pública, visto que a capivara está relacionada à transmissão de agentes zoonóticos como a febre maculosa (Rickettsia spp., vírus da varíola (Vaccinia virus), doença de chagas (Trypanosoma cruzi) e leishmaniose (Leishmania spp.)(Campos et al, 2019; Dutra, 2015; Ferrer et al., 2021).
Metodologia
Será feita a captura dos animais através de armadilha, após é feita a contenção e sedação, para então realizar a coleta de material biológico (sangue, fezes e carrapatos). Após a coleta, o material armazenado em caixas térmicas será transportado até o Laboratório de Biologia Molecular Veterinária (LabMol-Vet) na Universidade Federal de Pelotas, onde serão realizados testes moleculares como PCR.
● Captura e contenção: A captura será através de armadilha e consiste em um cercado móvel com o uso de ceva com milho e mecanismo de fechamento automático (revisado diariamente), com os animais sendo conduzidos a uma gaiola de contenção, onde serão imobilizados com auxílio de um cambão. A contenção farmacológica se dará através da aplicação de sedativo contendo a combinação de xilazina (0,5 mg/kg) e cetamina (5 mg/kg) via intramuscular.
● Coleta de material biológico: A coleta de sangue será feita em tubo contendo EDTA através de agulha e vacutainer na veia cefálica ou safena. Já a coleta de fezes será realizada manualmente direto da ampola retal e o material armazenado em pote plástico de coleta. Os carrapatos serão retirados através de torção para preservar o aparelho bucal e armazenados em tubo falcon de 50ml.
Metodologia específica: após a obtenção e transporte, será realizado o procedimento das amostras.
● Testes coprológicos: As amostras fecais serão submetidas a duas técnicas coprológicas para a pesquisa de parasitos, sendo elas de Sedimentação (Hoffmann, Pons e Janer) e Flutuação (Willis-Mollay).
● Identificação dos carrapatos: A identificação dos carrapatos será realizada através de observação com o auxílio de lupa e chaves de identificação encontradas em bibliografia estabelecida (Andreotti et al., 2016; Barros-Batesti, 2024). Posterior à identificação, os carrapatos serão submetidos à técnicas moleculares.
● Extração de DNA: Todas as amostras biológicas serão utilizadas para extração de DNA. O protocolo de extração a ser utilizado será com Quickzol - Trizol Reagente (Ludwig Biotecnologia) conforme instruções do fabricante.
● Reações de PCR: Nas reações de PCR, o mix será constituído de reagentes da empresa Ludwig Biotecnologia (Tampão, dNTP, MgCl2, Taq Polimerase) sendo as reações padronizadas conforme instruções do fabricante e também para cada agente de acordo com literatura prévia.
○ Rickettsia spp: Para a detecção desta bactéria, serão utilizados dois primers para diferentes genes, sendo CS78 e CS323 para o gene gltA, e Rr190.70p e Rr190.602n para o gene ompA. As condições da PCR vão de acordo com Labruna et al. (2004).
○ Trypanosoma sp.: Para Trypanosoma o par de primers a ser utilizado será o 121 e 122 direcionados ao kDNA, conforme descrito por Schijman et al. (2011).
○ Leishmania spp: Para detecção de Leishmania serão utilizados primers para a região ribossomal ITS1 de acordo com El Tai et al. (2000).
● Captura e contenção: A captura será através de armadilha e consiste em um cercado móvel com o uso de ceva com milho e mecanismo de fechamento automático (revisado diariamente), com os animais sendo conduzidos a uma gaiola de contenção, onde serão imobilizados com auxílio de um cambão. A contenção farmacológica se dará através da aplicação de sedativo contendo a combinação de xilazina (0,5 mg/kg) e cetamina (5 mg/kg) via intramuscular.
● Coleta de material biológico: A coleta de sangue será feita em tubo contendo EDTA através de agulha e vacutainer na veia cefálica ou safena. Já a coleta de fezes será realizada manualmente direto da ampola retal e o material armazenado em pote plástico de coleta. Os carrapatos serão retirados através de torção para preservar o aparelho bucal e armazenados em tubo falcon de 50ml.
Metodologia específica: após a obtenção e transporte, será realizado o procedimento das amostras.
● Testes coprológicos: As amostras fecais serão submetidas a duas técnicas coprológicas para a pesquisa de parasitos, sendo elas de Sedimentação (Hoffmann, Pons e Janer) e Flutuação (Willis-Mollay).
● Identificação dos carrapatos: A identificação dos carrapatos será realizada através de observação com o auxílio de lupa e chaves de identificação encontradas em bibliografia estabelecida (Andreotti et al., 2016; Barros-Batesti, 2024). Posterior à identificação, os carrapatos serão submetidos à técnicas moleculares.
● Extração de DNA: Todas as amostras biológicas serão utilizadas para extração de DNA. O protocolo de extração a ser utilizado será com Quickzol - Trizol Reagente (Ludwig Biotecnologia) conforme instruções do fabricante.
● Reações de PCR: Nas reações de PCR, o mix será constituído de reagentes da empresa Ludwig Biotecnologia (Tampão, dNTP, MgCl2, Taq Polimerase) sendo as reações padronizadas conforme instruções do fabricante e também para cada agente de acordo com literatura prévia.
○ Rickettsia spp: Para a detecção desta bactéria, serão utilizados dois primers para diferentes genes, sendo CS78 e CS323 para o gene gltA, e Rr190.70p e Rr190.602n para o gene ompA. As condições da PCR vão de acordo com Labruna et al. (2004).
○ Trypanosoma sp.: Para Trypanosoma o par de primers a ser utilizado será o 121 e 122 direcionados ao kDNA, conforme descrito por Schijman et al. (2011).
○ Leishmania spp: Para detecção de Leishmania serão utilizados primers para a região ribossomal ITS1 de acordo com El Tai et al. (2000).
Indicadores, Metas e Resultados
Com o presente trabalho espera-se elucidar o conhecimento acerca das doenças que acometem as capivaras (Hydrochaeris hydrochaeris) bem como seu impacto na saúde pública.
Equipe do Projeto
| Nome | CH Semanal | Data inicial | Data final |
|---|---|---|---|
| BIBIANA RODRIGUES DE FREITAS | |||
| ESTÉFANI RINALDI | |||
| GUSTAVO CARDOSO FERREIRA KLANN | |||
| PEDRO MACHADO MEDEIROS DE ALBUQUERQUE | |||
| RODRIGO CASQUERO CUNHA | 1 | ||
| TAMIRES SILVA DOS SANTOS | |||
| VICTORIA DA ROSA LEITE SILVA |
Fontes Financiadoras
| Sigla / Nome | Valor | Administrador |
|---|---|---|
| CAPES / Coordenação de Aperfeiçoamento de Nível Superior | R$ 4.800,00 | Coordenador |
Plano de Aplicação de Despesas
| Descrição | Valor |
|---|---|
| 339030 - Material de Consumo | R$ 4.800,00 |