Nome do Projeto
Estudo de propriedades imunomoduladoras de bactérias do gênero Bacillus spp.
Ênfase
PESQUISA
Data inicial - Data final
02/12/2019 - 02/02/2022
Unidade de Origem
Coordenador Atual
Área CNPq
Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
Resumo
Probióticos são definidos como “micro-organismos vivos que quando administrados em quantidades adequadas conferem benefícios à saúde do hospedeiro”. Diversos gêneros de bactérias e leveduras são utilizados como probióticos, entretanto, os benefícios concedidos são cepa específicos, ou seja, mesmo em cepas de uma mesma espécie pode haver variações quanto aos efeitos proporcionados ao hospedeiro. Os gêneros Lactobacillus spp. e Bifdobacterium spp. são os mais amplamente estudados quanto aos seus efeitos probióticos. Os mecanismos pelos quais micro-organismos atuam no sistema imune ainda não são totalmente elucidados, tornando relevante a avalição utilizando modelos animais. Assim, o experimento tem como objetivo avaliar a cultura primária de macrófagos peritoneais obtidos de camundongos quando estimulados com bactérias do gênero Bacillus spp. Para isso, será realizada a coleta de macrófagos peritoneais de camundongos. Os animais serão eutanasiados com aproximadamente 40 dias de vida. É importante salientar que os animais não serão submetidos a nenhum tratamento in vivo. A coleta será realizada através da injeção 10 ml de PBS pela parede peritoneal ao longo do lado esquerdo do camundongo (lado do baço) e será realizado um aspirado do fluído peritoneal para coleta dos macrófagos. Todo restante do experimento será realizado in vitro. O cultivo primário de macrófagos peritoneais será submetido a diferentes estímulos. Como estímulos probióticos serão utilizadas diferentes espécies de bactérias do gênero Bacillus spp. (células vegetativas, esporos vivos e inativados, sobrenadante do cultivo de células vegetativas e DNA), como controle positivo será utilizado o mitógeno inespecífico concanavalina A (conA) e o lipopolissacarídeo LPS. Os estímulos serão deixados em contato com as células de cultivo primário por um período de 24, 48 e 72 horas. Após cada um desses períodos as células serão coletadas e será realizada a extração de RNA, síntese de DNA complementar e PCR em tempo real para avaliar a expressão de citocinas como IL-10, IL-12, IL-4 e IFN-ɣ. O objetivo desse teste é analisar, através da expressão de citocinas, a maneira como espécies de Bacillus spp. modulam a resposta imunológica. Os mesmos testes serão realizados com a linhagem celular de macrófagos RAW 264.7 e os resultados obtidos em ambos teste serão comparados a fim de verificar se existe diferença significativa (estabelecida através da utilização de métodos estatísticos) entre as duas respostas.

Objetivo Geral

O projeto tem como objetivo principal contribuir para elucidar mecanismos pelos quais os probióticos a base de Bacillus spp. interage com o sistema imunológico. De posse destas informações, possibilitarão o desenvolvimento de produtos e métodos que utilizem esse micro-organismos ou partes do mesmo como modulador do sistema imune. Para esses fins serão utilizadas duas linhagens celulares: RAW 264.7 e DH82 que correspondem a macrófagos murinos e caninos, respectivamente. Serão utilizadas células mononucleares do sangue periférico (PBMC) de caninos e murinos e macrófagos peritoneais de murinos.

Equipe do Projeto

NomeCH SemanalData inicialData final
GEFERSON FISCHER102/12/201902/02/2022
MARCELO DE LIMA102/12/201902/02/2022
NEIDA LUCIA CONRAD102/12/201902/02/2022
RENATA NOBRE DA FONSECA1002/12/201902/02/2022
RODRIGO CASQUERO CUNHA102/12/201902/02/2022
SILVIA DE OLIVEIRA HUBNER102/12/201902/02/2022

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