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22/05/2014 - 31/08/2016

Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal

Seis machos suínos sexualmente maduros serão utilizados como doadores de sêmen. Três machos comporão o grupo controle, recebendo ração comercial específica para reprodutores, e os demais três machos receberão a mesma ração suplementada com 60 g/dia de óleo natural de peixes (fonte de ômega 3). A suplementação iniciará um mês antes do experimento e se estenderá até a data da última coleta de sêmen. A coleta dos ejaculados será feita pelo método da mão enluvada. Serão coletados doze ejaculados de cada macho. Nas coletas de sêmen, será medida a espessura de toucinho dos machos por ultrassonografia e serão colhidas amostras de sangue, para obtenção de soros para análise pela técnica de ELISA. O sêmen congelado será armazenado em palhetas de 0,5 ml, contendo 1 × 109 espermatozoides. Antes do congelamento e após o descongelamento, serão avaliadas a motilidade e a morfologia espermáticas, por microscopia ótica com contraste de fase. A integridade da membrana espermática, do acrossoma e do DNA espermático serão avaliadas por citometria de fluxo. A produção de espécies reativas de oxigênio (ROS) será avaliada pelo teste de cinética modificado, com leitura através fluorímetro. A presença dos receptores para leptina e IGF-1 na membrana espermática, antes e após o congelamento do sêmen, será avaliada por imunocitoquímica. As amostras de sangue serão usadas nas análises dos marcadores IGF-I e leptina, através da técnica de ELISA. A quantificação dos marcadores metabólicos será realizada por métodos colorimétricos com espectrofotômetro de luz visível FEMTO 435®, através de kits reagentes específicos. As respostas de interesse (ET, nível de dosagem hormonal, quantidade de receptores de leptina e IGF-1 e parâmetros de qualidade seminal) serão comparadas entre os tratamentos através de análise de variância com medidas repetidas, com o efeito da data das coletas agrupado ao efeito individual dos machos. As comparações entre médias serão feitas pelo método LSD. Nos casos nos quais não houver normalidade na distribuição dos dados, as comparações serão feitas com o teste não paramétrico dos rankings de Wilcoxon.