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30/08/2016 - 30/08/2019

Ciências Agrárias - Medicina Veterinária

A partir de estudos onde foi observado efeito citoprotetor das HSP’s durante processos de criopreservação, e a maior expressão de HSP70 no parênquima testicular após administração de Geranilgeranil acetona, está sendo proposto este estudo com o objetivo de avaliar os efeitos da administração oral de geranilgeranil acetona, durante a espermatogênese na expressão de proteínas de choque térmico de 70 kDa nos espermatozoides de camundongos swiss, e correlacionar com a qualidade seminal durante o processo de refrigeração. O estudo será composto de 28 camundongos swiss, 50 dias de idade, divididos em um grupo controle e um grupo que receberá uma emulsão de 600 mg/kg de geranilgeranil acetona por via oral, diariamente, por 6 semanas. Posteriormente, os animais serão eutanasiados e o sêmen será coletado conforme o método adaptado de excisão da cauda do epidídimo, os espermatozoides serão diluídos e a amostra será submetida a Análise Espermática Assistida por Computador, no momento da coleta e a cada hora subsequente do processo de refrigeração. As amostras serão centrifugadas e os espermatozoides serão lisados, fervidos e armazenados a -20°C. Proteínas de 2x106 espermatozoides serão separados através do SDS-PAGE 9% de acordo com o método Laemmli (1970), e serão analisados através de Western Blot, sendo incubadas com anticorpos policlonal de coelho contra HSP70 de camundongos e β-Tubulina. As membranas serão reveladas e a quantidade de proteínas HSP70 será mensurada em densitometria. A estatística utilizará o Teste T, considerando p<0,05, para comparar os níveis de HSP e qualidade seminal entre os grupos.