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06/04/2006 - 06/04/2014

Ciências da Saúde - Odontologia

O objetivo deste estudo será avaliar o efeito de fator pró-angiogênico na formação de tecido pulpar por engenharia tecidual, a partir de células-tronco da polpa dental, in vitro e in vivo. CT pulpares (DPSCs) serão cultivadas e proliferadas, para serem semeadas em matrizes poliméricas sintéticas (scaffolds de PLLA), com ou sem células endoteliais (HDMEC). No estudo in vitro, as matrizes serão colocadas no interior da câmara pulpar e canal radicular de terceiros molares recém-extraídos e que tenham o tecido pulpar removido. Os órgãos dentais serão cultivados por 2 a 4 semanas para posterior análise. No estudo in vivo, matrizes poliméricas contendo DPSCs serão implantadas no dorso de ratos imunodeprimidos (SCID), com ou sem a inclusão de células endoteliais (HDMECs), sendo deixadas por períodos até 4 semanas, quando os ratos serão mortos e os tecidos produzidos por engenharia tecidual preparados para avaliação. Os tecidos produzidos in vitro serão submetidos à análise histológica e imunoistoquímica (Fator VIII e DSPP), comparando-se os controles (sem HDMEC) e os grupos experimentais (com HDMEC). Na parte in vivo, os tecidos produzidos sofrerão análise histológica e imunoistoquímica (Fator VIII e DSPP). Além disso, células odontoblásticas e endoteliais dos grupos controle e experimental serão capturadas por microdissecção a laser e a expressão gênica do VEGF e da DSPP será avaliada por RT-PCR e PCR em tempo real. A análise estatística dos dados, comparando grupos controle e experimental será realizada através da análise de variância (ANOVA), com nível de significância de 95%.