Nome do Projeto
Vacina recombinante truncada contra Rhipicephalus microplus
Ênfase
Pesquisa
Data inicial - Data final
01/07/2024 - 01/12/2027
Unidade de Origem
Coordenador Atual
Área CNPq
Ciências Agrárias
Resumo
O carrapato Rhipicephalus microplus é um ácaro do filo artrópodes, monóxeno e parasito de bovinos. As infestações por carrapatos Rhipicephalus microplus, distribuem-se no mundo entre os paralelos 32⁰ de latitude norte e 32⁰ de latitude sul, com maior prevalência em áreas tropicais diminuindo no sentido das áreas sub tropicais. No Brasil é considerado endêmico a exceção de poucas regiões de diferentes biomas ao sul abaixo do paralelo 32⁰ de latitude sul praticamente inexiste nos municípios de Santa Vitória do Palmar e Chuí. As perdas mundiais por carrapatos são muito importantes a ponto de produzir no Brasil perdas da ordem de quatro e meio milhões de dólares, além de outros prejuízos. por hematozoários transmitidos por carrapatos e agentes etiológicos da Babesiose e Anapalasmose bovinas reconhecidos nacionalmente como tristeza parasitária bovina e pelo alto impacto relacionados nas regiões parasitadas e nos rebanhos infestados. O controle do carrapato é feito com drogas acaricidas e simultaneamente ocorre controle ecológico e imunológico por imunidade natural dos bovinos ao carrapato. Gradativamente, em muitas propriedades rurais, tem-se evidenciado a resistência dos carrapatos à maioria dos princípios ativos disponíveis, produzindo descontrole nos rebanhos. O controle ecológico ocorre naturalmente pela ação de aves, artrópodos, fungos, bactéria e protozoários. A imunidade natural aos carrapatos se desenvolve a partir de infestações sucessivas ao longo da vida dos bovinos com produção de resposta imune humoral e celular. Existe grande expectativa do desenvolvimento de estratégias artificiais pelo emprego de vacinas recombinantes usando proteínas candidatas de origem de intestino, glândula salivar e ovário dos carrapatos, além de enzimas metabólicas. Atualmente no Brasil ainda não existe vacina recombinante nacional e disponível comercialmente. O presente projeto tem por objetivos expressar proteínas recombinantes a partir de clones selecionados, preparar vacina com diferentes adjuvantes e imunizar bovinos sob condições de campo em zonas livres no município de Santa Vitória do Palmar, RS e desafio de infestações de carrapatos sob condições de estábulo. Com o uso da vacina recombinante desenvolvida espera-se oferecer proteção consistente em rebanhos contra infestações de carrapatos. O produto e processo em desenvolvimento encontra-se sob regime confidencial em vistas a obtenção de patente junto ao Instituto Nacional de Propriedade Industrial como tecnologia genuinamente nacional.

Objetivo Geral

Desenvolver uma vacina recombinante com potencial imunogênico contra carrapatos de bovinos.

Justificativa

O carrapato é um problema para ...

Metodologia

Expressão da proteína recombinante sob condições específicas a partir de um clone recombinante para ser induzido, contemplando todas as etapas até a purificação e posteriormente a diálise este processo está padronizado.
SDS-PAGE
Western Blotting
Quantificação por espectrofotômetro filtro A280;
ELISA indireto em triplicata;
Os ensaios serão realizados com o soros primários, coletados em cada desafio; e os animais serão de raça europeia;
2 grupos de animais (número de teleógenas fixadas):
Grupo 1 recebe 2mL da formulação vacinal;
Grupo 2 recebe 2mL de uma solução placebo;
Animais de zona indene receberão 2 doses após serem transferidos para zona endêmica e a última dose na propriedade de destino;
Administração intramuscular no intervalo de 0, 30 e 150 dias
. Os animais serão infestados naturalmente com R. microplus.
No momento da contagem de teleógenas fixadas para randomização dos grupos, também serão colhidas teleógenas ingurgitadas, as quais serão incubadas a 27 °C, 80% de umidade, para realizarem postura.
Os efeitos da vacinação na população desse carrapato serão avaliados pela contagem, seguida de coleta de teleógenas fixadas nos animais de cada grupo. Dados referentes a diferenças no ELISA serão submetidos a análise da variância e as médias serão comparadas pelo Teste-t de Student, com nível de significância de 5%;



Indicadores, Metas e Resultados

Produzir 100 doses de vacina no primeiro ano, 160 doses no segundo ano e outras 100 doses no terceiro ano.
No primeiro ano, vacinar 30 vacas de leite de um produtor de São Lourenço do Sul, RS, que tem aproximadamente 200 animais.
No segundo ano, vacinar 50 terneiros uma propriedade de gado de corte do Capão do Leão, RS.
No terceiro ano, vacinar 30 terneiros de zona livre do “carrapato do boi”, em Santa Vitória do Palmar, RS.
Monitorar a taxa de infestação por R. microplus nos animais vacinados e em uma amostragem dos não vacinados.
Monitorar a duração da resposta imune nos animais vacinados, por ELISA indireto.
Obter o tempo de duração da proteção vacinal nas três condições experimentais.
Obter o resultado do teste de porcentagem de eficácia da vacina nas três condições experimentais.

Registrar o pedido de patente de, pelo menos, um produto e um processo relacionados ao desenvolvimento da vacina.

Equipe do Projeto

NomeCH SemanalData inicialData final
Jaqueline de Deos Silveira
KAUÊ RODRIGUEZ MARTINS
RODRIGO CASQUERO CUNHA2
STHÉPHANI ALVES BRANCO CAMARGO

Fontes Financiadoras

Sigla / NomeValorAdministrador
PROAP/CAPES / Coordenação de Aperfeiçoamento de Nível SuperiorR$ 3.600,00Coordenador

Plano de Aplicação de Despesas

DescriçãoValor
339030 - Material de ConsumoR$ 3.600,00

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