Nome do Projeto
Exposição ao Sevoflurano e sua influência em parâmetros reprodutivos em camundongos machos
Ênfase
Pesquisa
Data inicial - Data final
04/04/2024 - 04/04/2028
Unidade de Origem
Coordenador Atual
Área CNPq
Ciências Agrárias
Resumo
O sevoflurano é um anestésico inalatório mais utilizado em humanos (CESAROVIC et al. 2010) que vem sendo usado a mais de vinte anos. Sua segurança e eficácia são bem estabelecidas e continuam sendo estudadas mais precisamente para definir seus efeitos em diferentes populações, pacientes e organismos (BRIONI et al. 2017). Diversos estudos veem mostrando que anestésicos inalatórios podem causar danos ao sistema reprodutor masculino, e a toxicidade reprodutiva e danos na espermatogênese possivelmente causados pelo sevoflurano podem estar relacionados à exposição precoce (BADEN et al., 1979; CEYHAN et al., 2005; COATE et al., 1979). A possibilidade de que a exposição crônica a baixos níveis de agentes anestésicos constitua um perigo para o profissional da área da saúde, despertou e manteve o interesse mundial desde o início da década de 70. Dependendo do momento da vida em que ocorre à exposição, existe a preocupação de que esses mecanismos subjacentes possam resultar, por sua vez, em uma incidência aumentada de morte fetal, aborto espontâneo, defeitos no nascimento (COHEN et al., 1971; COHEN et al., 1975). Neste processo, através de lapatoromia, cauda do epidídimo e parte do ducto deferente são removidos e colocados em placa de petri (35 mm), contendo 500 μl de Dulbeco’s phosphate buffered saline (DPBS), previamente aquecido e mantido a 37ºC. A coleta do sêmen é feita a partir do rompimento das estruturas anatômicas, a partir de 5 a 7 cortes, com auxílio de agulha hipodérmica (30 G) e pinça, para obtenção de uma suspensão de espermatozóides. Esse material é mantido na placa aquecida até que sejam realizadas as avaliações de cinética espermática no sistema computadorizado CASA (motilidade total, progressiva, parâmetros de velocidade) e na citometria de fluxo serão avaliada a integridade de membrana plasmática do espermatozoide, funcionalidade mitocondrial, integridade de DNA espermática e produção de espécies reativas de oxigênio. Experimento 2: Para esse experimento será utilizado acasalamento poligâmico 1 macho para duas fêmeas conforme o CONCEA/2023. Serão utilizados 5 animais dos tratamentos de exposição controle, aguda e crônica, para 10 fêmeas cada. Desta forma será no final a amostragem de 188 filhotes. Os machos serão expostos aos tratamentos e depois acasalados com fêmeas que não tiveram nenhum contato com o sevoflurano. Os filhotes serão avaliados a distância urogenital ao nascimento, relação de machos e fêmeas, com 23 dias será avaliado a interação social e outras avaliações comportamentais, após 33 dias será realizada a eutanásia dos animais para coleta de córtex cerebral, hipocampos, cerebelo, análise estresse oxidativo e superoxido dismutase. Faz-se necessário investigar sobre a importância, atuação e mecanismos de ação dos anestésicos inalatórios, em especial o sevoflurano, no eixo hormonal, e na produção e desenvolvimento de espermatozoides; assim como, o risco de exposição dos pacientes e de trabalhadores da área da saúde. A exposição aos machos e depois acasalar os mesmos, vem responder uma lacuna sobre os efeitos na progênie, pois existem alguns trabalhos que relatam o efeito deste anestésico no aumento de crianças com autismo.

Objetivo Geral

Avaliar os efeitos da exposição ao sevoflurano em células espermáticas e hormônios reprodutivos de
camundongos Swiss Albina, frente à exposição aguda e subexposição crônica, comparando efeitos
imediatos e tardios, que compreendam desde o acometimento de células espermáticas já existentes
nos momentos de exposição, quanto à espermatogênese subsequente.

Justificativa

A busca por novos dados e resultados sobre a influência dos anestésicos inalatórios em parâmetros
reprodutivos nos machos veem sendo trabalhado por diversos pesquisadores nos últimos anos.
Ceyhan (2005) e colaboradores realizaram uma pesquisa onde se avaliou a qualidade e quantidade
espermática de coelhos expostos a concentrações baixas de sevoflurano, simulando uma inalação
crônica (1.2% Concentração alveolar mínima – CAM) por 4 horas durante 5 dias. Foi encontrada
uma diminuição progressiva tanto na motilidade quanto na quantidade espermática quando
comparada com o grupo controle que não foi exposto ao anestésico. Além disso foi relatado
anormalidades no formato e dimensão dos espermatozoides, sendo considerados imaturos.
Estudos realizados com animais de laboratório têm demonstrado diversos resultados semelhantes na
avaliação do sevoflurano e seu impacto na reprodução. Yanhong et al. (2019), avaliou os efeitos da
exposição crônica em camundongos machos em três concentrações diferentes, sendo baixa (50ppm),
média (300ppm) e alta (1800ppm). Observou-se uma diminuição significante, dose dependente, da
quantidade de sêmen desses animais e identificado áreas de apoptose celular no tecido testicular e
túbulos seminíferos, onde nos grupos com maiores concentrações do anestésico resultou em maior
destruição celular e tecidual.
Este autor também avaliou os efeitos sobre a função hormonal dos animais, os níveis séricos de FSH
e LH apresentaram um aumento crescente conforme o grau de exposição ao sevoflurano, enquanto
os níveis de testosterona se mostraram baixos nos grupos com concentrações de 50 ppm, 300ppm e
1800ppm quando comparados com o controle. Os resultados demonstraram que o sevoflurano pode
afetar a secreção de hormônios sexuais de forma dose dependente. Os níveis de GnRH encontraramse alterados para menos, tanto no hipotálamo quanto na glândula pituitária

Metodologia

Os animais serão divididos em 3 grupos: O grupo controle (G0) não terá exposição ao sevoflurano
sendo eutanasiado através de deslocamento cervical ao final do experimento; o grupo 1 (G1) será
anestesiado de forma usual através de um vaporizador calibrado durante 60 minutos, com valores de
Concentração Alveolar Mínima de 4% para indução e manutenção em torno de 2%, e seus
parâmetros fisiológicos serão avaliados e monitorados constantemente, após 20 dias será eutanasiado
por deslocamento cervical (ZANIN, et al., 2023); o grupo2 (G2) será exposto ao anestésico de forma
crônica por seis horas em uma concentração média de 50ppm de sevoflurano (XU, et al., 2012) por
20 dias e posteriormente eutanasiado também por deslocamento cervical.

Indicadores, Metas e Resultados

- DETERMINAR O MOMENTO DA TOXICIDADE
- SE O EFEITO É CONTÍNUO AS PRÓXIMAS GERAÇÕES

Equipe do Projeto

NomeCH SemanalData inicialData final
CARINE DAHL CORCINI2
CATIANE PRESTES DOS SANTOS
GUSTAVO DESIRÉ ANTUNES GASTAL
SABRINA KOHLS DE ARAUJO

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