Nome do Projeto
Sequenciamento de nova geração de microRNAs em espermatozoides bovinos transfectados com nanopolímero catiônico
Ênfase
PESQUISA
Data inicial - Data final
01/06/2015 - 01/08/2017
Unidade de Origem
Área CNPq
Multidisciplinar - Biotecnologia
Resumo
A NanoSMGT é um método recente e inovador, desenvolvido pela presente equipe proponente, para a produção de animais transgênicos em que a nanotecnologia é empregada para melhorar a capacidade de transfecção de DNA nos espermatozoides submetidos à SMGT. Recentemente, demonstramos a transfecção de DNA em espermatozoides bovinos sexados utilizando um nanopolímero catiônico, trazendo a possibilidade da geração de bovinos transgênicos com sexo predefinido. Entretanto, tem sido relatado que as interações do espermatozoide com o DNA exógeno podem desencadear uma atividade de nucleases endógenas que clivam o DNA genômico, podendo levar a uma perda de capacidade fertilizante do espermatozoide. Além do genoma, os espermatozoides carregam uma mistura de RNAs contendo microRNAs (miRNAs), os quais são moléculas incapazes de codificar proteínas e que apresentam função na regulação pós-transcricional, dessa forma, estes miRNAs atuam como reguladores epigenéticos do genoma. Estes miRNAs podem também influenciar a capacidade fertilizante das células espermáticas e assim são considerados um mecanismo molecular essencial para a fertilização e para o desenvolvimento embrionário inicial. O sequenciamento de nova geração tem contribuído significativamente para a elucidação do papel que estes miRNAs desempenham nos espermatozoides. Contudo, até o presente momento, nenhum trabalho avaliou os efeitos da transfecção de DNA exógeno associada a nanoestruturas sobre o perfil dos miRNAs nos espermatozoides. Neste sentido, a presente proposta objetiva avaliar os efeitos da transfecção de DNA associaciado à nanopolímero catiônico sobre a população de miRNAs presentes em espermatozoides bovinos através de sequenciamento de nova geração.

Objetivo Geral

Objetivo geral

Avaliar o efeito da transfecção de DNA associado à nanopolímero catiônico na população de miRNAs presentes em espermatozoides bovinos através de sequenciamento de nova geração.

Objetivos específicos

a) Transfectar DNA exógeno associado à nanopolímero catiônico para espermatozoides bovinos
b) Realizar o sequenciamento de nova geração de miRNA em espermatozoides bovinos transfectados com DNA exógeno associado à nanopolímero catiônico
c) Validar a expressão diferencial dos miRNA no sequenciamento de nova geração por PCR em tempo real

Equipe do Projeto

NomeCH SemanalData inicialData final
EDUARDA COSTA BUENO1201/08/201530/09/2015
EDUARDO BIERHALS BLÖDORN201/06/201501/08/2017
FABIANA KOMMLING SEIXAS201/06/201501/08/2017
INGRID MEDEIROS LESSA1201/08/201531/07/2016
ODIR ANTONIO DELLAGOSTIN101/06/201501/08/2017
THAISA PAPARAZZO1201/10/201531/07/2016
TIAGO VEIRAS COLLARES201/06/201501/08/2017
TONY LEANDRO REZENDE DA SILVEIRA201/06/201501/08/2017
WILLIAM BORGES DOMINGUES201/06/201501/08/2017

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