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15/06/2015 - 15/06/2017

Ciências Exatas e da Terra - Química

O objetivo deste trabalho será a produção de nanocompósitos magnéticos assistido por uma síntese solvotermal, e subsequente aplicação na área biotecnológica, tanto na entrega de fármaco como também na biosseparação de proteínas. Também, busca-se o desenvolvimento de nanocápsulas à base de monoglicerídeos para ser utilizado juntamente com estes materiais na entrega de fármacos. Para o desenvolvimento deste trabalho, serão utilizadas metodologias convencionais e inéditas para elaboração do nanocompósito magnético como: a síntese solvo termal por micro-ondas, a implementação de um óxido inédito com características magnéticas substituindo Fe3O4, uso de atmosfera redutora da mistura de N2/ H2, averiguação da morfologia do composto por microscopia de varredura eletrônica (MEV) e de transmissão eletrônica (MET), e caracterização da fase do óxido por difração de raio-X (XRD). Também, para a caracterização das propriedades magnéticas será utilizado equipamento específico com intuito de testar a intensidade de ferromagnetismo das partículas e a preparação de nanocápsulas com morfologia elipsoidal. Referente a aplicação biológica em células tumorais serão realizadas metodologias de cultivo celular, ensaios de hemólise, da lactato desidrogenase (LDH), de Iodeto de Propídeo (PI) e de ligação com anexina V, imunomarcação de LC3A/B, teste da membrana mitocondrial (MTT), expressão de proteínas apoptóticas e enzimas antioxidantes por qPCR, citoxidade in vitro, teste de imagem de ressonância magnética (MRI), observações com microscopia confocal de varredura a laser (CLSM) e de transmissão eletrônica biológica (Bio-TEM). Entretanto, para o âmbito da obtenção de proteínas recombinantes com cauda de histidina serão realizadas análises para averiguar atividades e capacidades das esferas magnéticas na separação das proteínas marcadas, comprovação da reciclabilidade das esferas magnéticas por teste Turkey ou ANOVA, ensaios que comprovem a afinidade de ligação das esferas magnéticas com a proteína purificada, expressão e purificação das proteínas purificadas expostas pelo uso de sódio eletroforese em gel de poliacrilamida de sulfato de dodecilo (SDS-PAGE), avaliação da proteína purificada por Western blot e por ELISA.