Nome do Projeto
Klebsiella pneumoniae KPC: aspectos epidemiológicos, moleculares e terapêuticos.
Ênfase
PESQUISA
Data inicial - Data final
01/06/2017 - 01/06/2020
Unidade de Origem
Coordenador Atual
Área CNPq
Ciências Biológicas - Microbiologia
Resumo
É notório o aumento na frequência de doenças infecciosas causadas por microrganismos multirresistentes (MMR) nas instituições de saúde e na comunidade, sendo alguns microrganismos os maiores responsáveis pelo agravamento da situação, devido a sua resistência a antimicrobianos comumente utilizados, dificultando assim a terapêutica. Existindo a importância do levantamento da ocorrência de isolados produtores de carbapenemases para a clínica médica, o presente projeto tem como objetivo avaliar a presença de isolados de Klebsiella pneumoniae produtoras de carbapenemase tipo KPC, isoladas de pacientes internados em um hospital da cidade de Pelotas, RS. Os isolados de K. pneumoniae serão submetidos a análises microbiológicas, de sensibilidade a carbapenêmicos e caracterização molecular. A pesquisa da presença do gene kpc será realizada pela técnica de PCR e a relação genética entre os isolados de K. pneumoniae KPC será estudada utilizando-se a técnica de PFGE. Além disso, será determinada a capacidade formadora de biofilme dos isolados e também a atividade de novos compostos sintéticos e naturais na terapêutica contra estas bactérias. O desenvolvimento deste projeto possibilitará o monitoramento da ocorrência de cepas produtoras de carbapenemases do tipo KPC em K. pneumoniae de interesse clínico, contribuindo para delinear a amplitude do problema e para definir opções de tratamento e medidas de contenção adequadas. Além disso, a realização deste projeto oportunizará a formação de recursos humanos e a consolidação do grupo de pesquisa.
Objetivo Geral
2.1 OBJETIVO
Caracterização epidemiológica e molecular de isolados clínicos de Klebsiella pneumoniae produtoras de carbapenemases (KPC) obtidos de hospital da cidade de Pelotas, RS, Brasil e avaliação da atividade antibacteriana de compostos químicos sintéticos e naturais.
2.1.1 OBJETIVOS ESPECÍFICOS
- Montar um banco de isolados de K. pneumoniae oriundos de amostras clínicas obtidas em um hospital da cidade de Pelotas-RS, identificados através do sistema VITEK® 2 (BioMérieux) e de PCR para o gene espécie específico dnaA;
- Identificar os isolados de K. pneumoniae produtores de carbapenemases do tipo KPC, utilizando testes fenotípicos (antibiograma e teste modificado de Hodge) e moleculares (presença do gene kpc);
- Estabelecer a relação clonal entre os diversos isolados através da técnica de PFGE (eletroforese em gel de campo pulsado);
- Avaliar a capacidade formadora de biofilme e a presença de genes associados, como: fímbriais (fimH, fimA e mrkD), capsulares (rmp e wabG) e para adesina (ecpA);
- Determinar a concentração inibitória mínima (CIM) de compostos sintéticos e de compostos naturais contra os isolados de K. pneumoniae KPC;
- Avaliar a concentração bactericida mínima (CBM) com base nos resultados da CIM para estes compostos;
- Verificar a ação apresentada pelos compostos químicos sintéticos e naturais na capacidade formadora de biofilme dos isolados de K. pneumoniae KPC;
- Caracterizar a cinética de atividade antibacteriana dos compostos teste, bem como o efeito sinérgico antibacteriano entre os compostos químicos sintéticos, naturais e antibacterianos comerciais comumente utilizados na terapêutica contra os isolados de K. pneumoniae e em sua capacidade de formar biofilme;
- Determinar a citotoxicidade in vitro dos compostos químicos sintéticos e naturais testados.
Caracterização epidemiológica e molecular de isolados clínicos de Klebsiella pneumoniae produtoras de carbapenemases (KPC) obtidos de hospital da cidade de Pelotas, RS, Brasil e avaliação da atividade antibacteriana de compostos químicos sintéticos e naturais.
2.1.1 OBJETIVOS ESPECÍFICOS
- Montar um banco de isolados de K. pneumoniae oriundos de amostras clínicas obtidas em um hospital da cidade de Pelotas-RS, identificados através do sistema VITEK® 2 (BioMérieux) e de PCR para o gene espécie específico dnaA;
- Identificar os isolados de K. pneumoniae produtores de carbapenemases do tipo KPC, utilizando testes fenotípicos (antibiograma e teste modificado de Hodge) e moleculares (presença do gene kpc);
- Estabelecer a relação clonal entre os diversos isolados através da técnica de PFGE (eletroforese em gel de campo pulsado);
- Avaliar a capacidade formadora de biofilme e a presença de genes associados, como: fímbriais (fimH, fimA e mrkD), capsulares (rmp e wabG) e para adesina (ecpA);
- Determinar a concentração inibitória mínima (CIM) de compostos sintéticos e de compostos naturais contra os isolados de K. pneumoniae KPC;
- Avaliar a concentração bactericida mínima (CBM) com base nos resultados da CIM para estes compostos;
- Verificar a ação apresentada pelos compostos químicos sintéticos e naturais na capacidade formadora de biofilme dos isolados de K. pneumoniae KPC;
- Caracterizar a cinética de atividade antibacteriana dos compostos teste, bem como o efeito sinérgico antibacteriano entre os compostos químicos sintéticos, naturais e antibacterianos comerciais comumente utilizados na terapêutica contra os isolados de K. pneumoniae e em sua capacidade de formar biofilme;
- Determinar a citotoxicidade in vitro dos compostos químicos sintéticos e naturais testados.
Equipe do Projeto
| Nome | CH Semanal | Data inicial | Data final |
|---|---|---|---|
| BEATRIZ BOHNS PRUSKI | 8 | 01/06/2017 | 01/06/2020 |
| BÁRBARA COUTO ROLOFF PADILHA | 20 | 01/06/2017 | 01/06/2020 |
| CLÓVIS MOREIRA JR. | 2 | 01/06/2017 | 01/06/2020 |
| FABRICIO ROCHEDO CONCEICAO | 1 | 01/06/2017 | 01/06/2020 |
| HENRIQUE QUEIROZ SIMÃO | 4 | 01/06/2017 | 01/06/2020 |
| HENRIQUE QUEIROZ SIMÃO | 12 | 01/08/2017 | 31/07/2018 |
| LUIZA DE SOUZA KERN | 2 | 01/06/2017 | 01/06/2020 |
| MÁRCOS ROBERTO ALVES FERREIRA | 2 | 01/06/2017 | 01/06/2020 |
| STELLA BUCHHORN DE FREITAS | 2 | 01/06/2017 | 01/06/2020 |