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31/08/2017 - 31/12/2019

Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Medicina Veterinária Preventiva

A leptospirose, causada por bactérias patogênicas do gênero Leptospira, é uma das zoonoses de maior distribuição mundial causando graves danos à saúde pública e significativas perdas econômicas em animais de produção. As vacinas comercialmente disponíveis para leptospirose consistem em preparações de células inteiras inativadas do microrganismo, que, embora sejam mundialmente aplicadas em cães, bovinos e suínos, induzem proteção de curta duração contra a doença e imunidade somente contra sorovares antigenicamente relacionados àqueles presentes na formulação vacinal. Além disso, tais limitações tornam estas vacinas suscetíveis para uso humano somente em alguns poucos países. Em vista disto, há a necessidade do desenvolvimento de vacinas mais efetivas que possam ser utilizadas para o controle da doença. Baseado nisto, neste trabalho estamos propondo a construção e produção de uma vacina recombinante para leptospirose composta pela fusão e co-expressão de seis promissores antígenos de Leptospira spp. (LipL32, OmpL1, LipL41, LemA, LigA e LigB). Cada um destes seis antígenos já teve sua capacidade de proteção avaliada em ensaios anteriores e apresentaram resultados promissores. Para o desenvolvimento deste trabalho genes sintéticos serão produzidos e clonados em um vetor plasmidial, fornecido por uma empresa privada do ramo de vacinas e insumos veterinários. A expressão dos genes clonados neste vetor, seguida de etapas de purificação, permitirá a obtenção do complexo de proteínas intitulado EXOLEP. Afim de avaliar a capacidade de proteção desta nova formulação, hamsters serão imunizados com a vacina recombinante, em diferentes doses, seguida de desafio experimental com um inóculo letal de L. interrogans. Sangue será coletado a fim de avaliar a resposta imune humoral. Amostras de rim, fígado e pulmão serão coletadas para avaliar a presença de lesões e o reisolamento do agente será realizado a partir de amostras de tecido renal.