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01/02/2019 - 31/12/2021

Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Medicina Veterinária Preventiva

Causada por bactérias patogênicas do gênero Leptospira, a leptospirose é uma das zoonoses de maior distribuição mundial causando graves danos à saúde pública e significativas perdas econômicas em animais de produção. As vacinas comercialmente disponíveis para leptospirose consistem em preparações de células inteiras inativadas do microrganismo, que, embora sejam mundialmente aplicadas em cães, bovinos e suínos, induzem proteção de curta duração contra a doença e imunidade somente contra sorovares antigenicamente relacionados àqueles presentes na formulação vacinal. Além disso, tais limitações tornam estas vacinas suscetíveis para uso humano somente em alguns poucos países. Em vista disto, há a necessidade do desenvolvimento de vacinas mais efetivas que possam ser utilizadas para o controle da doença. Baseado nisto, neste trabalho estamos propondo a produção de vacinas recombinantes para leptospirose através da utilização de epítopos imunogênicos de OMPs com estrutura barril-β transmebrana com potencial imunoprotetor contra a doença. Estas construções consistem de três quimeras compostas pelas OMPs LIC12258, LIC10544 e LIC10539 (Quimera 1) LIC11366, LIC11975, LIC12252 e LIC11271 (Quimera 2) e LIC12693, LIC11941, LIC12307, LIC13135 e LIC12990 (Quimera 3) e cinco proteínas sintetizadas individualmente (GspD, FadL, OmpL68, OmpL72, OmpL94). A utilização dessa estratégia almeja reunir somente as porções expostas na membrana externa destas proteínas, as quais foram identificadas pela abordagem de Vacinologia Reversa e Estrutural. Para o desenvolvimento deste trabalho os genes serão quimicamente sintetizados e expressos em Escherichia coli. Após quantificação as proteínas recombinantes serão incoculadas em Ratos Wistar fêmeas para produção de soro policlonal, o qual será utilizado para posterior caracterização antigênica. As proteínas caracterizadas serão emulsificadas com adjuvante comercial para obtenção das vacinas recombinantes. A fim de avaliar a capacidade de proteção dessas novas formulações, hamsters serão imunizados com as vacinas recombinantes, em duas doses, seguido de desafio experimental com um inóculo letal de L. interrogans. Sangue será coletado para avaliar a resposta imune humoral. Amostras de rim, fígado e pulmão serão coletadas para avaliar a presença de lesões e indução de imunidade esterilizante.