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Em sistemas de produção intensiva, a produção de colostro frequentemente excede as necessidades nutricionais dos bezerros, resultando em descarte de um bioproduto rico em compostos bioativos. Essa prática representa não apenas uma perda econômica, mas também o subaproveitamento de uma matéria-prima funcional, com reconhecido potencial terapêutico. O colostro bovino é uma fonte natural de imunoglobulinas, fatores de crescimento, peptídeos antimicrobianos e citocinas, capazes de promover a regeneração tecidual, a modulação do sistema imunológico e a inibição de microrganismos patogênicos.
Diversos estudos in vitro e in vivo demonstram o potencial do colostro no processo de cicatrização de feridas, incluindo a indução da diferenciação celular, regeneração de tecidos e fechamento de lesões cutâneas.
Nesse cenário, o desenvolvimento de formulações tópicas, como pomadas à base de colostro, apresenta-se como uma estratégia inovadora para o tratamento de feridas crônicas ou de difícil cicatrização, especialmente em populações que enfrentam limitações ao acesso a tratamentos convencionais.
Além disso, a aplicação de métodos adequados de conservação, como a liofilização, garante a estabilidade dos compostos bioativos do colostro, permitindo sua formulação e armazenamento sem perda significativa de funcionalidade (Borad & Singh, 2018; Kim et al., 2022). Dessa forma, este estudo propõe o reaproveitamento do excedente de colostro bovino como base para o desenvolvimento de um produto de uso tópico com ação cicatrizante e antimicrobiana, contribuindo não apenas para a valorização de um subproduto agropecuário, mas também para a criação de terapias alternativas com impacto positivo na qualidade de vida de pacientes.

Análise da Composição Físico-químico/ Nutricional
Será realizada análise das amostras individuais (colocar o n) de colostro in natura e quanto a composição de acidez (nº 427/IV), proteína (nº 037/IV), sólidos totais (nº 429/IV) e cinzas (nº 437/IV) utilizando as metodologias do Instituto Adolfo Lutz (2008).

Métodos de Conservação
Liofilização
Com base nos resultados iniciais das análises físico-químicas, tres amostras serão selecionadas para o processo de liofilização. Essas amostras, previamente armazenadas em congelador, serão transferidas para um ultrafreezer a -30 °C por no mínimo 12 horas, com o objetivo de garantir um congelamento mais profundo antes do início da secagem. Em seguida, as amostras serão rapidamente colocadas no liofilizador, preservando a baixa temperatura e favorecendo a eficiência do processo. A primeira fase da liofilização, denominada secagem primária, será realizada sob vácuo e com aplicção controlada de calor, o que permitirá que a água presente no colostro, ainda no estado sólido, passe diretamente para o estado gasoso por sublimação. Esse processo provocará uma queda na temperatura do material congelado. A conclusão da secagem primária será indicada pelo aumento gradual da temperatura do produto, até atingir valores próximos à temperatura ambiente, ou pela observação da completa eliminação da interface entre as camadas seca e congelada.
A segunda fase, conhecida como dessorção ou secagem secundária, será iniciada após a remoção do gelo visível, mas com presença residual de água líquida. Nessa etapa, o colostro permanecerá no liofilizador por um período adicional de 2 a 6 horas, com aquecimento gradual até que a temperatura da amostra atinja o mesmo valor da placa de aquecimento (entre 20 °C e 60 °C), mantendo-se o vácuo. Esse processo possibilitará a remoção da maior parte da umidade residual, reduzindo-a para valores entre 2% e 8%.

Pasteurização
As amostras de colostro bovino serão submetidas ao processo de pasteurização a 60°C por 45 minutos, com o objetivo de garantir a segurança microbiológica sem comprometer a qualidade nutricional e bioativa do produto. Este tratamento térmico preserva os componentes essenciais do colostro, incluindo imunoglobulina G (IgG), proteínas, gordura, lactose, sólidos totais, insulina, lactoferrina e fator de crescimento IGF-1, mantendo suas concentrações dentro de níveis fisiológicos relevantes. A seleção de uma temperatura relativamente baixa e de um tempo prolongado visa minimizar a desnaturação proteica e preservar a atividade biológica dos fatores de crescimento e imunomoduladores presentes no colostro.
O colostro será colocado em frascos esterilizados e aquecido em banho-maria controlado a 60°C por 45 minutos. Durante o processo, a temperatura vai ser monitorada continuamente com termômetros digitais calibrados para garantir uniformidade térmica em todo o volume. Ao final do tempo estabelecido, as amostras serão rapidamente resfriadas a 4°C e armazenadas sob refrigeração até a realização das análises posteriores, assegurando a preservação de suas propriedades físico-químicas e bioativas.

Teste de citotoxicidade do colostro bovino
Para o ensaio de proliferação celular, inicialmente serão cultivadas células HaCaT em placas de microtitulação de 96 poços, com fundo plano, na densidade de 5×10⁴ células por poço. As placas serão incubadas por 24 horas a 37 °C, em atmosfera contendo 5% de CO₂. As células da linhagem VERO serão expostas ao colostro bovino, aplicado na concentração final de 0,05%. A análise da proliferação será conduzida por meio do Kit de Proliferação Celular I (MTT; Roche, Alemanha), conforme as instruções do fabricante. Todos os testes serão executados em triplicata e repetidos em, no mínimo, três experimentos independentes (CEN et al., 2021).

Ensaio in vitro de proliferação celular com a utilização de colostro bovino
Teste de Scratch sera realizado em celulas epiteliais (queratinocitos e fibroblastos) para verificar a capacidade de regeneração celular in vitro.

Atividade antimicrobiana do colostro bovino
Diferentes testes antimicrobianos serao realizados com colostro bovino para a verificação de inibião de microrganismos patogenicos na sua composição:
- Teste de difusao em Agar;
- Microdiluição em Caldo;
- Macrodiluição seriada.

Adição de um excipiente para formulação da pomada
Para a formulação da pomada à base de colostro bovino liofilizado, será utilizada a forma farmacêutica tipo pasta d’água. Os componentes serão pesados individualmente em balança analítica e homogeneizados em condições assépticas. A formulação será composta por colostro bovino liofilizado (quantidade a decidir), óxido de zinco ultrafino (25 g), talco neutro (25 g), glicerina (25 g) e água destilada suficiente para completar 100 mL de produto final.

Espera-se que o colostro bovino estimule a proliferação celular sem apresentar efeitos citotóxicos sobre os queratinócitos ou outras células testadas, demonstrando sua segurança para aplicação biológica.
Além disso, prevê-se que as características bioativas e nutricionais do colostro sejam preservadas após os processos de pasteurização e liofilização, mantendo níveis adequados de imunoglobulinas, fatores de crescimento e proteínas. Espera-se também que essas formas tratadas do colostro conservem atividade antibacteriana contra patógenos relevantes, ampliando seu potencial de uso como agente terapêutico ou funcional em diferentes contextos biológicos e clínicos.