Nome do Projeto
ISOLAMENTO, CARACTERIZAÇÃO E PERFIL DE SUSCETIBILIDADE IN VITRO DE Sporothrix spp. FRENTE A ANTIFÚNGICOS E COMPOSTOS NANOESTURTURADOS
Ênfase
Pesquisa
Data inicial - Data final
02/08/2024 - 01/03/2027
Unidade de Origem
Coordenador Atual
Área CNPq
Ciências Biológicas
Resumo
Sporothrix brasiliensis é o principal fungo causador da esporotricose felina no Brasil. Contudo, pode afetar outras espécies animais, tendo um relevante potencial zoonótico. Embora estudos envolvendo protocolos terapêuticos para a esporotricose tenham avançado nos últimos anos, a doença em felinos é um agravante de saúde pública. Além da baixa adesão ao tratamento, devido ao custo elevado e tempo prolongado de terapia, nota-se que a resistência antifúngica aos fármacos de eleição, particularmente ao itraconazol, é crescente. Desta forma, a pesquisa por outros compostos com atividade anti-Sporothrix spp. são necessárias para incrementar o arsenal terapêutico. Sendo assim, o objetivo do presente projeto é avaliar a suscetibilidade in vitro de isolados de Sporothrix spp. oriundos da região Sul e Sudeste do Brasil, frente aos antifúngicos cloridrato de amorolfina, terbinafina e itraconazol e a um composto nanoestruturado de nanopartículas biogênicas de prata (BioAgNP). Serão utilizados 37 isolados brasileiros de Sporothrix spp. oriundos da região Sul (Rio Grande do Sul) e Sudeste (Minas Gerais). Os testes de microdiluição em caldo seguirão o documento M27-A2 do Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). O inóculo fúngico será obtido de colônias de Sporothrix spp. cultivadas em ágar BHI/35°C/7 dias. Os fámacos serão avaliados nas seguintes concentrações: terbinafina (0.0312 µL/ml a 8 µL/ml), itraconazol (0,0625 μg/ml a 16 μg/ml), cloridrato de amorolfina (4 a 256 µL//ml) e Bio-AgNP(0,0075 a 3,76 µL//ml). As placas serão incubadas a 35°C/72 horas e a leitura levará em consideração o crescimento ou não de leveduras, sendo determinada a concentração inibitória mínima (CIM). As concentrações acima da CIM serão utilizadas para determinação da concentração fungicida mínima (CFM). Todos os testes serão realizados em triplicata e em duas repetições, realizadas em momentos diferentes. Espera-se que os fármacos avaliados apresentem potencial ação inibitória sobre Sporothrix spp., incrementando assim, o aresenal de compostos que poderão ser aplicados ao tratamento da esporotricose em animais e humanos. Este projeto gerará uma dissertação de mestrado, um artigo científico que será publicado em revista indexada e de impacto na área de Ciências Biológicas III, bem como os resultados serão apresentados em eventos e congressos científicos da área
Objetivo Geral
Realizar o isolamento e caracterização de Sporothrix spp. a partir de amostras clínicas de cães e gatos com suspeita de esporotricose, bem como avaliar a suscetibilidade in vitro dos isolados frente a antifúngicos e compostos nanoestruturados.
Justificativa
Considerando a esporotricose um agravante de saúde pública e por ser uma zoonose com alto custo em seu tratamento, faz-se necessário a busca de novas terapias, avaliando a suscetibilidade in vitro do Sporothrix spp., frente a diferentes fármacos como terbinafina, itraconazol, amorolfina e nano partículas de prata, visando um tratamento alternativo ao convencional, com menos efeitos adversos e um custo mais acessível.
Metodologia
- Isolamento de Sporothrix spp. a partir de amostras clínicas Serão recebidas amostras de cães e gatos com suspeita de esporotricose, oriundas de clínicas privadas do município de Capão do leão e Pelotas. Para a cultura fúngica, as amostras serão semeadas em ágar Sabouraud dextrose acrescido com cloranfenicol em temperatura de 37ºC por 7 dias, e/ou ágar mycosel em 25ºC por até 14 dias. As colônias suspeitas serão analisadas pelas suas características macro e micromorfológicas. A identificação em nível de espécie será realizada pela análise molecular em parceria com a Universidade Federal de Minas Gerais - UFMG.
- Ensaios de suscetibilidade in vitro: Para os testes de suscetibilidade in vitro serão utilizados 40 isolados de Sporothrix spp., oriundos de cães e gatos naturalmente infectados, pertencentes aos estados de Rio Grande do sul (n=20) e de Minas Gerais (n=20). Serão avaliados os fármacos terbinafina, itraconazol, cloridrato de amorolfina e nanopartículas biogênicas de prata. Os testes de microdiluição seguirão o protocolo M27-A2 do CLSI (2008).
- Ensaios de suscetibilidade in vitro: Para os testes de suscetibilidade in vitro serão utilizados 40 isolados de Sporothrix spp., oriundos de cães e gatos naturalmente infectados, pertencentes aos estados de Rio Grande do sul (n=20) e de Minas Gerais (n=20). Serão avaliados os fármacos terbinafina, itraconazol, cloridrato de amorolfina e nanopartículas biogênicas de prata. Os testes de microdiluição seguirão o protocolo M27-A2 do CLSI (2008).
Indicadores, Metas e Resultados
O uso indiscriminado e inadequado de antifúngicos no tratamento da esportricose felina, associado a dificuldade da administração do medicamento e seguimento do tratamento, têm colaborado para o surgimento de casos de resistência de Sporothrix spp. aos antifúngicos, particulamente ao itraconazol, antifúngico recomendado para o tratamento da esporotricose em animais e humanos. Desta forma, é importante avaliar a suscetibilidade deste patógeno a outros compostos, no sentido de ampliar as possibilidades terapêuticas e o arsenal de fármacos com atividade frente a Sporothrix spp.. Ao final da realização deste projeto, espera-se dispor de resultados promissores de fármacos para o tratamento da esporotricose felina e canina, que tenham ações eficientes, menos efeitos adversos e um custo benefício melhor, quando comparado a terapêutica disponível no mercado atual. Este projeto gerará uma dissertação de mestrado, um artigo científico que será publicados em revista indexada e de impacto na área de Ciências Biológicas III, bem como os resultados serão apresentados em eventos e congressos científicos da área.
Equipe do Projeto
Nome | CH Semanal | Data inicial | Data final |
---|---|---|---|
ANGELITA DOS REIS GOMES | 1 | ||
Aline Maciel dos Santos | |||
CAROLINA DOS SANTOS BERMANN | |||
CAROLINE QUINTANA BRAGA | |||
DANIELA ISABEL BRAYER PEREIRA | 2 | ||
HENRIQUE ZARNOTT RAATZ | |||
ISABELLA RODRIGUES DE ANDRADE | |||
JEFERSON LUIZ SILVA DE SOUZA | |||
LUCIÉLE PEREIRA DE MELO | |||
Maria Isabel Azevdo | |||
RENATA OSORIO DE FARIA | 1 | ||
YASMIN DUMMER RUAS |