Nome do Projeto
ISOLAMENTO, CARACTERIZAÇÃO E PERFIL DE SUSCETIBILIDADE IN VITRO DE Sporothrix spp. FRENTE A ANTIFÚNGICOS E COMPOSTOS NANOESTURTURADOS
Ênfase
Pesquisa
Data inicial - Data final
02/08/2024 - 01/03/2027
Unidade de Origem
Coordenador Atual
Área CNPq
Ciências Biológicas
Resumo
Sporothrix brasiliensis é o principal fungo causador da esporotricose felina no Brasil. Contudo, pode afetar outras espécies animais, tendo um relevante potencial zoonótico. Embora estudos envolvendo protocolos terapêuticos para a esporotricose tenham avançado nos últimos anos, a doença em felinos é um agravante de saúde pública. Além da baixa adesão ao tratamento, devido ao custo elevado e tempo prolongado de terapia, nota-se que a resistência antifúngica aos fármacos de eleição, particularmente ao itraconazol, é crescente. Desta forma, a pesquisa por outros compostos com atividade anti-Sporothrix spp. são necessárias para incrementar o arsenal terapêutico. Sendo assim, o objetivo do presente projeto é avaliar a suscetibilidade in vitro de isolados de Sporothrix spp. oriundos da região Sul e Sudeste do Brasil, frente aos antifúngicos cloridrato de amorolfina, terbinafina e itraconazol e a um composto nanoestruturado de nanopartículas biogênicas de prata (BioAgNP). Serão utilizados 37 isolados brasileiros de Sporothrix spp. oriundos da região Sul (Rio Grande do Sul) e Sudeste (Minas Gerais). Os testes de microdiluição em caldo seguirão o documento M27-A2 do Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI). O inóculo fúngico será obtido de colônias de Sporothrix spp. cultivadas em ágar BHI/35°C/7 dias. Os fámacos serão avaliados nas seguintes concentrações: terbinafina (0.0312 µL/ml a 8 µL/ml), itraconazol (0,0625 μg/ml a 16 μg/ml), cloridrato de amorolfina (4 a 256 µL//ml) e Bio-AgNP(0,0075 a 3,76 µL//ml). As placas serão incubadas a 35°C/72 horas e a leitura levará em consideração o crescimento ou não de leveduras, sendo determinada a concentração inibitória mínima (CIM). As concentrações acima da CIM serão utilizadas para determinação da concentração fungicida mínima (CFM). Todos os testes serão realizados em triplicata e em duas repetições, realizadas em momentos diferentes. Espera-se que os fármacos avaliados apresentem potencial ação inibitória sobre Sporothrix spp., incrementando assim, o aresenal de compostos que poderão ser aplicados ao tratamento da esporotricose em animais e humanos. Este projeto gerará uma dissertação de mestrado, um artigo científico que será publicado em revista indexada e de impacto na área de Ciências Biológicas III, bem como os resultados serão apresentados em eventos e congressos científicos da área

Objetivo Geral

Realizar o isolamento e caracterização de Sporothrix spp. a partir de amostras clínicas de cães e gatos com suspeita de esporotricose, bem como avaliar a suscetibilidade in vitro dos isolados frente a antifúngicos e compostos nanoestruturados.

Justificativa

Considerando a esporotricose um agravante de saúde pública e por ser uma zoonose com alto custo em seu tratamento, faz-se necessário a busca de novas terapias, avaliando a suscetibilidade in vitro do Sporothrix spp., frente a diferentes fármacos como terbinafina, itraconazol, amorolfina e nano partículas de prata, visando um tratamento alternativo ao convencional, com menos efeitos adversos e um custo mais acessível.

Metodologia

- Isolamento de Sporothrix spp. a partir de amostras clínicas Serão recebidas amostras de cães e gatos com suspeita de esporotricose, oriundas de clínicas privadas do município de Capão do leão e Pelotas. Para a cultura fúngica, as amostras serão semeadas em ágar Sabouraud dextrose acrescido com cloranfenicol em temperatura de 37ºC por 7 dias, e/ou ágar mycosel em 25ºC por até 14 dias. As colônias suspeitas serão analisadas pelas suas características macro e micromorfológicas. A identificação em nível de espécie será realizada pela análise molecular em parceria com a Universidade Federal de Minas Gerais - UFMG.
- Ensaios de suscetibilidade in vitro: Para os testes de suscetibilidade in vitro serão utilizados 40 isolados de Sporothrix spp., oriundos de cães e gatos naturalmente infectados, pertencentes aos estados de Rio Grande do sul (n=20) e de Minas Gerais (n=20). Serão avaliados os fármacos terbinafina, itraconazol, cloridrato de amorolfina e nanopartículas biogênicas de prata. Os testes de microdiluição seguirão o protocolo M27-A2 do CLSI (2008).

Indicadores, Metas e Resultados

O uso indiscriminado e inadequado de antifúngicos no tratamento da esportricose felina, associado a dificuldade da administração do medicamento e seguimento do tratamento, têm colaborado para o surgimento de casos de resistência de Sporothrix spp. aos antifúngicos, particulamente ao itraconazol, antifúngico recomendado para o tratamento da esporotricose em animais e humanos. Desta forma, é importante avaliar a suscetibilidade deste patógeno a outros compostos, no sentido de ampliar as possibilidades terapêuticas e o arsenal de fármacos com atividade frente a Sporothrix spp.. Ao final da realização deste projeto, espera-se dispor de resultados promissores de fármacos para o tratamento da esporotricose felina e canina, que tenham ações eficientes, menos efeitos adversos e um custo benefício melhor, quando comparado a terapêutica disponível no mercado atual. Este projeto gerará uma dissertação de mestrado, um artigo científico que será publicados em revista indexada e de impacto na área de Ciências Biológicas III, bem como os resultados serão apresentados em eventos e congressos científicos da área.

Equipe do Projeto

NomeCH SemanalData inicialData final
ANGELITA DOS REIS GOMES1
Aline Maciel dos Santos
CAROLINA DOS SANTOS BERMANN
CAROLINE QUINTANA BRAGA
DANIELA ISABEL BRAYER PEREIRA2
HENRIQUE ZARNOTT RAATZ
ISABELLA RODRIGUES DE ANDRADE
JEFERSON LUIZ SILVA DE SOUZA
LUCIÉLE PEREIRA DE MELO
Maria Isabel Azevdo
RENATA OSORIO DE FARIA1
YASMIN DUMMER RUAS

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