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23/04/2014 - 31/12/2017

Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada

A Biotecnologia é uma área multidisciplinar e importante no desenvolvimento de insumos imunobiológicos para o uso no diagnóstico de enfermidades humanas e animais. Contudo, apesar dos avanços biotecnológicos, ainda hoje muitas doenças infecto parasitárias que acometem o rebanho bovino são diagnosticadas por metodologias trabalhosas e onerosas. Como exemplo, podemos citar as dificuldades encontradas na bovinocultura para realizar o diagnostico de tuberculose, neosporose, leptospirose e infecção por Herpesvírus Bovino Tipo 5 (BoHV-5), as quais necessitam da produção de antígenos brutos obtidos através de cultivo celular em larga escala. Além do preparo do próprio insumo de diagnóstico, os laboratórios executores necessitam de adequação às normas de biossegurança associadas ao cultivo desses patógenos. Nesse contexto, a proposta desse projeto é a obtenção de antígenos expressos pelos patógenos causadores das enfermidades anteriormente citadas (tuberculose, neosporose, leptospirose e infecção por BoHV-5) em suas formas recombinantes e a produção de mAbs contra estes alvos, os quais serão utilizados no desenvolvimento de novos ensaios de diagnóstico, de fácil execução e baixo custo, para detecção e prevenção dessas doenças. A estrutura de laboratórios e equipamentos, assim como a adequação às normas de Biossegurança encontradas no PPGB/CDTec/UFPel (anexo I) permitirá de forma plena o desenvolvimento desse projeto e contribuirá na elaboração de metodologias alternativas com intuito de diminuir as perdas econômicas na bovinocultura. Dentre os alvos promissores para o desenvolvimento desses insumos diagnósticos foram escolhidos antígenos importantes no processo de patogenicidade e virulência de cada patógeno. Para Leptospira patogênica foram escolhidas as adesinas OmpL37 e LipL32; para Neospora caninum as proteínas imunodominantes Ncp43 e Ncp29; para Mycobacterium bovis foi escolhida a proteína de parede celular Ag85B e para o BoHV-5 foi escolhida a glicoproteína do envelope viral gE. Nessa perspectiva, o produto final a ser obtido são imunoensaios de diagnóstico aplicados à bovinocultura nos formatos de polarização da fluorescência (FPA) e enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). Esse objetivo será alcançado através da capacitação de profissionais especializados, a fim de que esses testes sejam brevemente comercializados.