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01/08/2017 - 31/07/2019

Ciências da Saúde - Nutrição - Bioquímica da Nutrição

Folículos ovarianos são importantes componentes do ovário de um mamífero. Exaustão dos folículos resulta na menopausa e no final da vida reprodutiva feminina. A restrição calórica (RC) tem sido praticada como um método para aumentar a longevidade e a qualidade de vida. Além disso, a RC aumenta a duração do período fértil em camundongos, visto que a RC inibe a transição de folículos primordiais para folículos primários, resultando no adiamento do esgotamento folicular. Da mesma forma a rapamicina promove aumento da longevidade de maneira muito semelhante ao observado para animais submetidos a RC, inibindo a via do mTOR, que é essencial no processo de regulação do envelhecimento ovariano. O objetivo geral do estudo é testar se os efeitos do tratamento com rapamicina se assemelham aos efeitos da restrição calórica com relação a preservação dos folículos primordiais e o envelhecimento ovariano em camundongos, e quais os mecanismos envolvidos. Para isso, serão utilizados 36 camundongos fêmeas da linhagem C57BL/6 mantidos com dieta padrão e água ad libitum. Os animais serão mantidos sob condições controladas de luz e temperatura (22 ± 2 °C, ciclos 12 horas claro/12 horas escuro). Os 36 camundongos serão divididos em 3 grupos de 12 animais cada (Controle; tratados com rapamicina e submetidos a restrição calórica de 30%). Aos 85 dias de tratamento, a sensibilidade periférica à insulina será avaliada através do Teste de Tolerância à insulina (TTI). Aos 90 dias de tratamento os camundongos serão anestesiados e eutanasiados, e os ovários serão coletados. Nos ovários será feita a quantificação do número de folículos ovarianos primordiais, primários, secundários terciários e a imunofluorescência para a proteína FOXO3a e FOXO3a fosforilada e H2FaX. Além disso, será feito a medição por real time PCR da expressão dos genes GHR, IGF-1, Akt1, Pi3k, mTOR, IRS-1, FoxO3a, MnSOD, Sirt1, BMP15, GDF9 e AMH.