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01/09/2018 - 01/12/2021

Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada

Bartonella henselae é uma bactéria Gram-negativa pertencente à família Rhizobiales, de crescimento fastidioso, intracelular facultativa e que pode infectar eritrócitos e células endoteliais de seus hospedeiros. O gênero Bartonella apresenta cerca de 22 espécies relacionadas com doenças em mamíferos, e B. henselae é considerada uma das espécies de maior importância médica, infectando tanto gatos quanto humanos. Os gatos infectados albergam a bactéria no interior de seus eritrócitos, que podem ser ingeridos pelas pulgas (Ctenocephalides felis), permanecendo em seu intestino. Posteriormente, as fezes destas pulgas contaminadas com B. henselae podem ser depositadas na pele dos gatos, e estes, ao se auto arranharem acabam contaminando suas garras. É dessa maneira que os humanos podem ser infectados, pela arranhadura de gatos, assim, B. henselae é considerada agente etiológico da Doença da Arranhadura do Gato (Cat Scratch Disease – CSD), que é uma infecção frequentemente auto-limitante em indivíduos imunocompetentes, e tem como principal sintoma a linfadenopatia regional. O diagnóstico preciso de bartonelose é um grande desafio, principalmente em pacientes com infecção crônica e de longa duração. Diversas técnicas convencionais têm demostrado limitações diagnósticas. O diagnóstico padrão para essa doença é realizado por imunofluorescência indireta utilizando antígenos de células inteiras co-cultivadas em células Vero, que tem boa sensibilidade, no entanto, são caros e costumam apresentar reações cruzadas. Um método de diagnóstico que vem sendo muito utilizado é o ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay), que utiliza antígenos de células inteiras, no entanto, apresenta uma baixa sensibilidade e especificidade, assim, a utilização de proteínas purificadas poderia melhorar o diagnóstico desta doença. Alguns estudos com proteínas recombinantes têm sido publicados. Nestes, proteínas reconhecidamente antigênicas, como GroEL, 17-kDa, Pap31, SucB e P26 têm sido produzidas de forma recombinante, e têm sido testadas em ensaios sorológicos, principalmente no ELISA. Entretanto, em todos os ensaios elas foram utilizadas de forma isolada, apresentando baixa sensibilidade, o que reforça o desenvolvimento de ensaios mais sensíveis e específicos. O objetivo desse estudo, é a predição in silico de epítopos estimuladores de linfócitos B e T, em proteínas antigênicas de B. henselae e a produção de proteínas quiméricas de maneira recombinante para uso em diagnóstico sorológico.