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17/12/2022 - 17/11/2024

Ciências Biológicas

A absorção intestinal de glicose através da membrana luminal ocorre por transporte ativo secundário acoplado ao influxo de Na+. Mais especificamente, no intestino a glicose compete com a galactose pelo mesmo sítio de ligação na proteína carreadora conhecida como transportador de sódio-glicose do tipo 1 (SGLT1). Para se testar a influência do SGLT1, tem sido utilizada preferencialmente a florizina, um membro da classe chalcona de compostos orgânicos, a qual inibe de forma específica e competitiva tanto o SGLT1 quanto o SGLT2. Sobre o carreador SGLT1, estudos têm mostrado que a sua expressão está estreitamente associada à composição da dieta e que sua exposição aos monossacarídeos pode modular sua ação/expressão. Tendo em vista os inúmeros problemas de saúde acometidos por uma alimentação inadequada, estudos com substâncias bioativas têm o potencial de contribuir positivamente para saúde da população ao reduzir o risco de doenças crônicas, além de conter substâncias que auxiliam a promoção da saúde, trazendo com isso uma melhora no estado nutricional. Neste contexto podemos destacar os cogumelos, em especial o Pleurotus ostreatus (P. ostreatus), uma espécie popular cultivada comercialmente em todo o mundo e que tem mostrado potencial anti-inflamatório, anti-hipertensivo, antinociceptivo, hipocolesterolemiante, antioxidante, antitumoral, etc. Objetivo: determinar a influência do extrato de Pleurotus ostreatus na absorção intestinal de glicose pelo SGLT1. Materiais e métodos: A pesquisa será desenvolvida nas dependências do Laboratório de Fisiologia Cardiovascular, no Biotério Central da Universidade Federal de Pelotas e no laboratório de nutrição experimental no campus ANGLO. O trabalho será dividido em três blocos de experimentos, sendo os dois primeiros de curto prazo com camundongos C57BL/6 magros e o terceiro de seis semanas de tratamento com extrato de P. ostreatus com camundongos C57BL/6 magros e deficientes do gene da leptina (ob/ob). O primeiro experimento será realizado por meio de três fases experimentais, em que será avaliado os efeitos de P. ostreatus sobre a absorção de glicose. No segundo experimento, contará apenas com uma fase experimental, em que será avaliada a influência do extrato sobre o transportador SGLT1. Já no terceiro experimento, será avaliada a influência da suplementação com extrato de P. ostreatus sobre a absorção intestinal de glicose de camundongos saudáveis e ob/ob. Para isso, os níveis de glicose serão mensurados através do teste oral de tolerância à glicose (TOTG) e através do teste de tolerância à glicose (TTG). Em ambos os testes será administrada uma solução de D-glicose (2g/kg de peso corporal dos camundongos). No entanto, no TOTG será administrada de forma oral e no TTG será feito de forma intraperitoneal. A expressão proteica será quantificada por Western Blot, através de amostras de intestino (jejuno proximal) dos animais pertencentes ao experimento 3. As membranas serão processadas por imunodetecção usando-se o anticorpo primário SGLT1 e GAPDH (Gliceraldeído 3-fosfato desidrogenase). E, por fim, a expressão gênica dos transportadores SGLT1, GLUT2 e GLUT 5 serão avaliadas por qPCR. Ao término de cada experimento, os animais serão devidamente eutanasiados por aprofundamento anestésico e exsanguinação para coleta dos tecidos alvo.