Nome do Projeto
Microrganismos multi-resistentes aos antimicrobianos: similaridade entre isolados humanos e animais
Ênfase
Pesquisa
Data inicial - Data final
31/07/2024 - 31/07/2026
Unidade de Origem
Coordenador Atual
Área CNPq
Ciências Biológicas
Resumo
Um grave problema em Saúde Única presente nos dias de hoje, é a resistência de cepas bacterianas aos antimicrobianos. Diversas espécies de microrganismos que provocam doenças tanto em pessoas, quanto em animais, como por exemplo, Staphylococcus aureus e Escherichia coli, evoluíram desenvolvendo diferentes mecanismos para sobreviver frente à exposição aos fármacos utilizados tanto na medicina humana, quanto na medicina veterinária, para combater esses agentes etiológicos em quadros infecciosos. Ao longo de décadas de pesquisa, foram identificados genes, no DNA desses microrganismos, que levam a resistência dos mesmos aos antimicrobianos. Também foram verificados que os mesmos genes presentes em microrganismos isolados em uma determinada espécie animal hospedeira, estavam presentes em microrganismos isolados de outra espécie hospedeira, e até mesmo em microrganismos isolados em humanos. Na região sul do Rio Grande do Sul verificou-se que Staphylococcus spp. são os microrganismos mais presentes em casos de mastite em rebanhos leiteiros. Na mesma região verificaram-se Staphylococcus coagulase positiva resistentes à meticilina em derivados lácteos comercializados diretamente ao consumidor final. Também sabe-se que há ocorrência de infecções graves em unidades de terapia intensiva dos hospitais da mesma região. Este estudo busca verificar, através de técnicas moleculares, se existe similaridade entre os microrganismos de mesma espécie, isolados nas infecções humanas, em animais, e em produtos de origem animal, da região sul do Rio Grande do Sul. Será verificada a suscetibilidade aos antimicrobianos e seus fatores de resistência. Para o estudo serão utilizados microrganismos multirresistentes isolados em pessoas, animais e produtos de origem animal, que encontram-se estocados na Universidade Federal de Pelotas (UFPEL). Serão realizados antibiogramas de cada isolado da mesma espécie, confirmados através de PCR, bem como pesquisados os genes de resistência aos antimicrobianos de cada isolado. Ao final, serão comparados os resultados obtidos, e realizadas as provas estatísticas. Espera-se, além de caracterizar os microrganismos estudados quanto aos fatores de resistência aos antimicrobianos, confirmar ou descartar a hipótese de que há similaridade entre esses fatores, na região.

Objetivo Geral

Verificar o perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos e os fatores de
resistência de bactérias multirresistentes isoladas do homem, animais e
produtos lácteos, na região sul do Rio Grande do Sul.


Objetivos específicos:
a) descrever a origem dos microrganismos estudados;
b) Confirmar caracterização bioquímica com identificação molecular
c) estabelecer o perfil de suscetibilidade frente aos agentes antimicrobianos dos microrganismos estudados;
d) verificar os fatores de resistência dos microrganismos estudados;
e) Caracterizar os antimicrobianos mais utilizados pelos veterinarios da regiao sul.

Justificativa

Em uma determinada região geográfica, o sul do Rio Grande do Sul, foram
isolados em hospitais humanos Staphylococcus aureus multirresistentes,
Escherichia coli ESBL, entre outros agentes multirresistentes. Nessa mesma região,
foi verificada a presença de Staphylococcus sp. como o principal causador de
mastites em rebanhos leiteiros, bem como foram encontrados em derivados lácteos
Staphylococcus coagulase positivo resistentes à meticilina.
A luz do conceito de saúde única, faz-se necessário conhecer, se há
similaridade entre o perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos dos
microrganismos isolados em pessoas doentes, animais e produtos de origem animal
dessa mesma região. Também é de suma importância a busca pelos fatores que
conferem resistência aos microrganismos encontrados, a fim de conhecer se há
similaridade entre eles

Metodologia

. Seleção de amostra, critérios de inclusão e exclusão
Serão selecionados todos os isolados disponíveis para o estudo estocados no Laboratório de Microbiologia e
Bioprospecção (DEMP - IB) e no Laboratório de Inspeção de Produtos de Origem Animal (DVP - FV). Posteriormente, serão excluídas aquelas que não atenderem aos critérios estabelecidos para o presente estudo.

. Isolamento dos microrganismos
Para o presente estudo, esses microrganismos serão
descongelados, recuperados em caldo Infusão-cérebro-coração (BHI) estéril, e
posteriormente multiplicados em meios de cultura apropriados para cada espécie.

Antibiograma

Todos os isolados serão submetidos ao antibiograma, para definição do perfil
de sensibilidade e resistência. Para definição dos microrganismos que serão
incluídos utilizará-se a técnica de discos de difusão, sobre a cultura em Ágar
Müller-Hinton [23]. Posteriormente, os microrganismos que apresentarem
multirresistência, serão submetidos ao antibiograma pela técnica de concentração
inibitória mínima (MIC).
A definição dos antimicrobianos que serão testados será baseada em dois
critérios: antimicrobianos recomendados pelo CLSI para a espécie bacteriana;
antimicrobianos que sejam utilizados em animais, na região estudada [23]. Para
definição dos antimicrobianos utilizados na região, será aplicado um questionário
aos médicos-veterinários que atuam na região, a fim de verificar quais as drogas
mais frequentes.

Biologia Molecular
Os microrganismos objeto de estudo terão seu material genético extraído por
técnica apropriada, e sua identificação será confirmada por técnica molecular.
Posteriormente, será feita uma busca ativa pelos genes que confirmem fatores de
resistência para antimicrobianos a esses microrganismos.

Análise Estatística

Indicadores, Metas e Resultados

Através do presente estudo, esperam-se como resultados:
a) a caracterização dos microrganismos de origem humana e animal quanto a
sensibilidade e resistência aos antimicrobianos, bem como a identificação
dos fatores de resistência dos mesmos;
b) aceitação, ou rejeição da hipótese de nulidade H0.

Equipe do Projeto

NomeCH SemanalData inicialData final
ATHENA CRISTINA DE AZAMBUJA RODRIGUES
CAMILA DOS SANTOS CARDOZO
Cristina Studzinski Svenson
FABIO RAPHAEL PASCOTI BRUHN2
FERNANDA DE REZENDE PINTO4
HELENICE GONZALEZ DE LIMA9
KELLY GUEDES
LISIANE CRUZ DA SILVA3
LUCAS SCHAEFER BATISTA
MARIA GABRIELA CUSTODIO KOBAYASHI
MARISA CASTRO JARA
NATACHA DEBONI CERESER6
PALOMA DA SILVA COELHO
PATRICIA DA SILVA NASCENTE6
RITA DE CASSIA DOS SANTOS DA CONCEICAO4
ROSANA BASSO KRAUS
SILVIA REGINA LEAL LADEIRA1

Fontes Financiadoras

Sigla / NomeValorAdministrador
PROAP/CAPES / Coordenação de Aperfeiçoamento de Nível SuperiorR$ 1.200,00Coordenador

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