Nome do Projeto
Microrganismos multi-resistentes aos antimicrobianos: similaridade entre isolados humanos e animais
Ênfase
Pesquisa
Data inicial - Data final
31/07/2024 - 31/07/2026
Unidade de Origem
Coordenador Atual
Área CNPq
Ciências Biológicas
Resumo
Um grave problema em Saúde Única presente nos dias de hoje, é a resistência de
cepas bacterianas aos antimicrobianos. Diversas espécies de microrganismos que
provocam doenças tanto em pessoas, quanto em animais, como por exemplo,
Staphylococcus aureus e Escherichia coli, evoluíram desenvolvendo diferentes
mecanismos para sobreviver frente à exposição aos fármacos utilizados tanto na
medicina humana, quanto na medicina veterinária, para combater esses agentes
etiológicos em quadros infecciosos. Ao longo de décadas de pesquisa, foram
identificados genes, no DNA desses microrganismos, que levam a resistência dos
mesmos aos antimicrobianos. Também foram verificados que os mesmos genes
presentes em microrganismos isolados em uma determinada espécie animal
hospedeira, estavam presentes em microrganismos isolados de outra espécie
hospedeira, e até mesmo em microrganismos isolados em humanos. Na região sul
do Rio Grande do Sul verificou-se que Staphylococcus spp. são os microrganismos
mais presentes em casos de mastite em rebanhos leiteiros. Na mesma região
verificaram-se Staphylococcus coagulase positiva resistentes à meticilina em
derivados lácteos comercializados diretamente ao consumidor final. Também
sabe-se que há ocorrência de infecções graves em unidades de terapia intensiva
dos hospitais da mesma região. Este estudo busca verificar, através de técnicas
moleculares, se existe similaridade entre os microrganismos de mesma espécie,
isolados nas infecções humanas, em animais, e em produtos de origem animal, da
região sul do Rio Grande do Sul. Será verificada a suscetibilidade aos
antimicrobianos e seus fatores de resistência. Para o estudo serão utilizados
microrganismos multirresistentes isolados em pessoas, animais e produtos de
origem animal, que encontram-se estocados na Universidade Federal de Pelotas
(UFPEL). Serão realizados antibiogramas de cada isolado da mesma espécie,
confirmados através de PCR, bem como pesquisados os genes de resistência aos
antimicrobianos de cada isolado. Ao final, serão comparados os resultados obtidos,
e realizadas as provas estatísticas. Espera-se, além de caracterizar os
microrganismos estudados quanto aos fatores de resistência aos antimicrobianos,
confirmar ou descartar a hipótese de que há similaridade entre esses fatores, na
região.
Objetivo Geral
Verificar o perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos e os fatores de
resistência de bactérias multirresistentes isoladas do homem, animais e
produtos lácteos, na região sul do Rio Grande do Sul.
Objetivos específicos:
a) descrever a origem dos microrganismos estudados;
b) Confirmar caracterização bioquímica com identificação molecular
c) estabelecer o perfil de suscetibilidade frente aos agentes antimicrobianos dos microrganismos estudados;
d) verificar os fatores de resistência dos microrganismos estudados;
e) Caracterizar os antimicrobianos mais utilizados pelos veterinarios da regiao sul.
resistência de bactérias multirresistentes isoladas do homem, animais e
produtos lácteos, na região sul do Rio Grande do Sul.
Objetivos específicos:
a) descrever a origem dos microrganismos estudados;
b) Confirmar caracterização bioquímica com identificação molecular
c) estabelecer o perfil de suscetibilidade frente aos agentes antimicrobianos dos microrganismos estudados;
d) verificar os fatores de resistência dos microrganismos estudados;
e) Caracterizar os antimicrobianos mais utilizados pelos veterinarios da regiao sul.
Justificativa
Em uma determinada região geográfica, o sul do Rio Grande do Sul, foram
isolados em hospitais humanos Staphylococcus aureus multirresistentes,
Escherichia coli ESBL, entre outros agentes multirresistentes. Nessa mesma região,
foi verificada a presença de Staphylococcus sp. como o principal causador de
mastites em rebanhos leiteiros, bem como foram encontrados em derivados lácteos
Staphylococcus coagulase positivo resistentes à meticilina.
A luz do conceito de saúde única, faz-se necessário conhecer, se há
similaridade entre o perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos dos
microrganismos isolados em pessoas doentes, animais e produtos de origem animal
dessa mesma região. Também é de suma importância a busca pelos fatores que
conferem resistência aos microrganismos encontrados, a fim de conhecer se há
similaridade entre eles
isolados em hospitais humanos Staphylococcus aureus multirresistentes,
Escherichia coli ESBL, entre outros agentes multirresistentes. Nessa mesma região,
foi verificada a presença de Staphylococcus sp. como o principal causador de
mastites em rebanhos leiteiros, bem como foram encontrados em derivados lácteos
Staphylococcus coagulase positivo resistentes à meticilina.
A luz do conceito de saúde única, faz-se necessário conhecer, se há
similaridade entre o perfil de suscetibilidade aos antimicrobianos dos
microrganismos isolados em pessoas doentes, animais e produtos de origem animal
dessa mesma região. Também é de suma importância a busca pelos fatores que
conferem resistência aos microrganismos encontrados, a fim de conhecer se há
similaridade entre eles
Metodologia
. Seleção de amostra, critérios de inclusão e exclusão
Serão selecionados todos os isolados disponíveis para o estudo estocados no Laboratório de Microbiologia e
Bioprospecção (DEMP - IB) e no Laboratório de Inspeção de Produtos de Origem Animal (DVP - FV). Posteriormente, serão excluídas aquelas que não atenderem aos critérios estabelecidos para o presente estudo.
. Isolamento dos microrganismos
Para o presente estudo, esses microrganismos serão
descongelados, recuperados em caldo Infusão-cérebro-coração (BHI) estéril, e
posteriormente multiplicados em meios de cultura apropriados para cada espécie.
Antibiograma
Todos os isolados serão submetidos ao antibiograma, para definição do perfil
de sensibilidade e resistência. Para definição dos microrganismos que serão
incluídos utilizará-se a técnica de discos de difusão, sobre a cultura em Ágar
Müller-Hinton [23]. Posteriormente, os microrganismos que apresentarem
multirresistência, serão submetidos ao antibiograma pela técnica de concentração
inibitória mínima (MIC).
A definição dos antimicrobianos que serão testados será baseada em dois
critérios: antimicrobianos recomendados pelo CLSI para a espécie bacteriana;
antimicrobianos que sejam utilizados em animais, na região estudada [23]. Para
definição dos antimicrobianos utilizados na região, será aplicado um questionário
aos médicos-veterinários que atuam na região, a fim de verificar quais as drogas
mais frequentes.
Biologia Molecular
Os microrganismos objeto de estudo terão seu material genético extraído por
técnica apropriada, e sua identificação será confirmada por técnica molecular.
Posteriormente, será feita uma busca ativa pelos genes que confirmem fatores de
resistência para antimicrobianos a esses microrganismos.
Análise Estatística
Serão selecionados todos os isolados disponíveis para o estudo estocados no Laboratório de Microbiologia e
Bioprospecção (DEMP - IB) e no Laboratório de Inspeção de Produtos de Origem Animal (DVP - FV). Posteriormente, serão excluídas aquelas que não atenderem aos critérios estabelecidos para o presente estudo.
. Isolamento dos microrganismos
Para o presente estudo, esses microrganismos serão
descongelados, recuperados em caldo Infusão-cérebro-coração (BHI) estéril, e
posteriormente multiplicados em meios de cultura apropriados para cada espécie.
Antibiograma
Todos os isolados serão submetidos ao antibiograma, para definição do perfil
de sensibilidade e resistência. Para definição dos microrganismos que serão
incluídos utilizará-se a técnica de discos de difusão, sobre a cultura em Ágar
Müller-Hinton [23]. Posteriormente, os microrganismos que apresentarem
multirresistência, serão submetidos ao antibiograma pela técnica de concentração
inibitória mínima (MIC).
A definição dos antimicrobianos que serão testados será baseada em dois
critérios: antimicrobianos recomendados pelo CLSI para a espécie bacteriana;
antimicrobianos que sejam utilizados em animais, na região estudada [23]. Para
definição dos antimicrobianos utilizados na região, será aplicado um questionário
aos médicos-veterinários que atuam na região, a fim de verificar quais as drogas
mais frequentes.
Biologia Molecular
Os microrganismos objeto de estudo terão seu material genético extraído por
técnica apropriada, e sua identificação será confirmada por técnica molecular.
Posteriormente, será feita uma busca ativa pelos genes que confirmem fatores de
resistência para antimicrobianos a esses microrganismos.
Análise Estatística
Indicadores, Metas e Resultados
Através do presente estudo, esperam-se como resultados:
a) a caracterização dos microrganismos de origem humana e animal quanto a
sensibilidade e resistência aos antimicrobianos, bem como a identificação
dos fatores de resistência dos mesmos;
b) aceitação, ou rejeição da hipótese de nulidade H0.
a) a caracterização dos microrganismos de origem humana e animal quanto a
sensibilidade e resistência aos antimicrobianos, bem como a identificação
dos fatores de resistência dos mesmos;
b) aceitação, ou rejeição da hipótese de nulidade H0.
Equipe do Projeto
Nome | CH Semanal | Data inicial | Data final |
---|---|---|---|
ATHENA CRISTINA DE AZAMBUJA RODRIGUES | |||
CAMILA DOS SANTOS CARDOZO | |||
Cristina Studzinski Svenson | |||
FABIO RAPHAEL PASCOTI BRUHN | 2 | ||
FERNANDA DE REZENDE PINTO | 4 | ||
HELENICE GONZALEZ DE LIMA | 9 | ||
KELLY GUEDES | |||
LISIANE CRUZ DA SILVA | 3 | ||
LUCAS SCHAEFER BATISTA | |||
MARIA GABRIELA CUSTODIO KOBAYASHI | |||
MARISA CASTRO JARA | |||
NATACHA DEBONI CERESER | 6 | ||
PALOMA DA SILVA COELHO | |||
PATRICIA DA SILVA NASCENTE | 6 | ||
RITA DE CASSIA DOS SANTOS DA CONCEICAO | 4 | ||
ROSANA BASSO KRAUS | |||
SILVIA REGINA LEAL LADEIRA | 1 |
Fontes Financiadoras
Sigla / Nome | Valor | Administrador |
---|---|---|
PROAP/CAPES / Coordenação de Aperfeiçoamento de Nível Superior | R$ 1.200,00 | Coordenador |