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Conhecendo a importância do colostro nas propriedades rurais, mas também sabendo que muitas vezes seu excedente é descartado pelo produtor e de todo potencial existente nesse produto quanto a qualidade nutricional, microbiológica e ainda imunológica, este trabalho se justifica pela busca de alternativas para o uso do colostro, valorizando ainda mais essa matéria prima rica e de baixo custo.

Coleta das amostras
Serão utilizadas 50 amostras de colostro in natura para serem analisadas. As amostras serão obtidas de propriedades leiteiras localizadas na região sul do Rio Grande do Sul. Os dados da propriedade e do animal serão solicitados aos proprietários e colocados em planilhas especificas.

Isolamento e Identificação de micro-organismos
As amostras serão semeadas em placas de Petri contendo o meio de cultivo agar MRS e levadas a estufa a 35.5 °C, onde permanecerão por até 72 horas para o crescimento dos micro-organismos. Após este período, serão repicadas por esgotamento as amostras que crescerem em ágar MRS e levadas a estufa novamente a 35.5 °C por 48 horas para a identificação. Para fungos sera usado Agar Sabouraud dextrose a 37C por 48 horas.

Avaliação do potencial Probiótico dos Lactobacillus isolados
Para Lactobacillus sera realizado teste de Suscetibilidade a antibióticos, atividade Hemolítica, da gelatinase , degradação da mucina, Teste de desoxirribonuclease (DNase), Avaliação da tolerância no trato gastrointestinal, Autoagragação, co-agregação e hidrofobicidade.

Atividade antibacteriana
A atividade antibacteriana será verificada seguindo a metodologia de Fleming, Etchells & Costilow (1975). As zonas de inibição ao redor dos isolados de LAB indicarão resultados positivos, que serão expressos em milímetros. Os patógenos utilizados serão L. monocytogenes ATCC 7644, S. aureus ATCC 25923, E. coli ATCC 8739 e S. Typhimurium ATCC 14028, pois são comumente ligados a doenças transmitidas por alimentos.

Análise da Composição Físico-químico/ Nutricional
Será realizada análise das amostras individuais de colostro in natura e quanto a composição de acidez (nº 427/IV), proteína (nº 037/IV), sólidos totais (nº 429/IV) e cinzas (nº 437/IV) utilizando as metodologias do Instituto Adolfo Lutz (2008).

Estudo dos componentes celulares e imunológicos do colostro bovino
Para a avaliação dos componentes celulares e imunológicos será realizada uma revisão bibliográfica de acordo com as diretrizes fornecidas na declaração PRISMA (MOHER, D.; LIBERATI, A.; TETZLAFF, J.; ALTMAN, 2015). Para agrupar estudos relevantes na área, uma busca será realizada por dois pesquisadores habilitados. A pesquisa será realizada nas seguintes bases de dados: Google School, Web Of Science, Medline (através do Pub Med), Scielo, Scopus, Embase e Chochrane.

Ensaio, in vitro, de Citotoxicidade celular com a utilização do colostro bovino
Será utilizada a linhagem celular VERO, obtida do rim de macaco Cercopithecus aethiops, por se tratar de uma linhagem celular bem estabelecida. O meio utilizado será Gibco Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) suplementado com 10% de FBS, a 37°C com 5% de dióxido de carbono. As células serão cultivadas rotineiramente em placa de Petri da Corning (Corning, EUA). Vinte e quatro horas após a semeadura, as células serão tratadas com de colostro comercial a 0,05% e permanecerão na estufa por 72h. Após esse período, a viabilidade celular será determinada usando brometo de 3-(4,5-dimetil-2-tiazolil)-2,5-difenil-2H-tetrazólio (MTT) (BHULLA et al., 2018).

Ensaio in vitro de migração e proliferação celular com a utilização de colostro bovino
Antes do ensaio de proliferação celular, as células HaCaT serão semeadas em uma placa de fundo plano de micro titulação de 96 poços com 5x104 células/poço e incubadas a 24h por 37°C em 5% de CO2. As células VERO serão tratadas com colostro na concentração final de 0,05%. O ensaio de proliferação celular será realizado usando o Kit de proliferação celular I (MTT; Roche, Alemanha) de acordo com o protocolo fornecido pela empresa. Os ensaios de migração celular serão realizados de maneira semelhante à descrita anteriormente para o ensaio de proliferação, mas 10 μg/ml de Mitomicina C será adicionado como um inibidor de proliferação celular. Ambos experimentos serão realizados pelo menos três vezes com replicações independentes (CEN et al., 2021).

Liofilizacao e Spray Dryer
Essas duas metodologias de decagem do leite como forma de armazenamento serao testadas no colostro reavaliando as suas propriedades apos o processamento.

Com os resultados obtidos nesse trabalho, espera-se inovar na utilização do colostro bovino como matéria prima em subprodutos de uso humano e animal, através da constatação de suas propriedades nutricionais, microbiológicas, imunológicas e celulares.
Espera-se também, a obtenção de resultados que fomentem a elaboração de artigos científicos e trabalhos para congressos, com o objetivo de difundir o conhecimento aqui adquirido.